人肝癌細(xì)胞HepG2來(lái)源于一個(gè)15歲白人的肝癌組織。該細(xì)胞分泌多種血漿蛋白:清蛋白、α2-巨球蛋白、血纖維蛋白溶酶原、鐵傳遞蛋白等。肝癌是一種惡性程度極高，預(yù)后極差的惡性腫瘤，雖然現(xiàn)代新的腫瘤化療、生物治療藥物和手段非常多，但由于其早期診斷率低、術(shù)后復(fù)發(fā)率高而預(yù)后差?；熓悄壳爸委煾伟┑闹饕o助手段之一1） 來(lái)源：40歲 原發(fā)性肝細(xì)胞癌
2） 形態(tài)：上皮樣 貼壁生長(zhǎng)細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s，吸走潤(rùn)洗的PBS；3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細(xì)胞層；4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；5.消化到細(xì)胞間隙變大，但未完全脫落時(shí)加2-3ml完全培養(yǎng)基終止胰酶消化；6.混勻細(xì)胞，900rpm離心3-5min，棄上清；7.加新的完全培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；8.補(bǔ)足完全培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；1:2傳代人源（Homo sapiens）男（Male）肝（Liver）采用先中性蛋白酶消化、后胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)貼壁生長(zhǎng)（Adherent）51歲（51 years）上皮樣細(xì)胞（Epithelial-like）肝細(xì)胞癌（Hepatocellular carcinoma）人肝癌細(xì)胞可用于細(xì)胞腫瘤學(xué)研究。