73731-37-0

100-51-6

175291-56-2

以(2S,3R)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-羥基丁酸和苯甲醇為原料合成(2S,3R)-2-((((9H-芴-9-基)甲氧基)羰基)氨基)-3-(((芐氧基)(羥基)磷酰基)氧基)丁酸的一般步驟如下： 1. 原料預(yù)處理：將氨基保護(hù)的氨基酸（水合形式）干燥至水分含量<0.5%（重量）。稱取干燥的氨基保護(hù)氨基酸（1.0當(dāng)量）加入反應(yīng)燒瓶中。加入無(wú)水THF（4體積，EMD OmniSolv HPLC級(jí)，>99.99%），并在燒瓶外標(biāo)記總體積。將混合物加熱至70℃，在700毫巴下蒸餾除去約2體積的THF。用干燥的THF補(bǔ)充至原始標(biāo)記體積，重復(fù)此蒸餾和稀釋過(guò)程兩次。最終通過(guò)Karl-Fischer滴定確認(rèn)氨基酸溶液的含水量<0.20%（重量）。 2. 二氯亞磷酸酯制備：在氮?dú)獗Ｗo(hù)下，向燒瓶中加入THF（8體積），冷卻至0℃。緩慢加入PCl3（1.30當(dāng)量，Aldrich，Reagent Plus級(jí)，99%），保持反應(yīng)溫度在0-5℃?？蛇x加入吡啶（1當(dāng)量，Aldrich，無(wú)水，99+%）以維持反應(yīng)溫度在-5至5℃。隨后加入芐醇（1.50當(dāng)量，Aldrich，ACS級(jí)，99+%），保持溫度在-5至5℃。反應(yīng)混合物在0-5℃攪拌5分鐘，通過(guò)31P NMR確認(rèn)PCl3的完全消耗。加入2,6-二甲基吡啶（3.00當(dāng)量，Aldrich，>99%），維持反應(yīng)溫度在-5至5℃，形成稠漿。 3. 亞磷酸酯中間體制備：向干燥的氨基保護(hù)氨基酸溶液中加入2,6-二甲基吡啶（1.0當(dāng)量）。將此溶液緩慢加入步驟1的混合物中，保持反應(yīng)溫度在-5至5℃。用額外THF（1體積）沖洗燒瓶，確保完全轉(zhuǎn)移。反應(yīng)開始后5分鐘，每隔10分鐘進(jìn)行HPLC分析（方法1），直至APG-AA與中間亞磷酸酯的比例穩(wěn)定。 4. 水解：確認(rèn)反應(yīng)完成后，緩慢加入H2O（3.6體積），保持反應(yīng)溫度不超過(guò)10℃，形成兩相溶液。 5. 氧化：向兩相混合物中加入NaBr（2.32當(dāng)量，Aldrich，ACS級(jí)，99+%）和NaBrO3水溶液（20重量%，0.48當(dāng)量，Riedel-de-Haen，puriss級(jí)，98%），保持反應(yīng)在0-5℃。氧化完成后，讓反應(yīng)緩慢升溫至室溫，避免超過(guò)30℃。通過(guò)HPLC確認(rèn)亞磷酸酯中間體含量<1.5%。最后，一次性加入Na2S2O5水溶液（10重量%，1體積，Sigma-Aldrich，ACS級(jí)，97+%）以終止反應(yīng)。 產(chǎn)物表征：1H NMR、13C NMR、31P NMR和HRMS數(shù)據(jù)與目標(biāo)化合物結(jié)構(gòu)一致，比旋度為+5.99°。

參考文獻(xiàn)：

[1] Patent: WO2013/12416, 2013, A1. Location in patent: Page/Page column 70-71; 75