產(chǎn)品概述
本試劑盒基于探針法熒光定量PCR技術(shù)開發(fā)，專用于快速、高靈敏度檢測立枯絲核菌（Rhizoctonia solani）的核酸。適用于科研領(lǐng)域，可對組織、血液、糞便、食品等樣本中的病原體進行定性和定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 立枯絲核菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Rhizoctonia solani Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4835 |
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供DNA/RNA模板，試劑盒包含預(yù)混優(yōu)化的緩沖液、酶、引物及探針。
高靈敏度與特異性：引物及探針針對立枯絲核菌保守序列設(shè)計，避免交叉反應(yīng)。
內(nèi)置對照：提供無傳染性DNA片段作為陽性對照，便于區(qū)分假陰性結(jié)果。
寬動態(tài)范圍：定量檢測線性范圍達5個數(shù)量級（10^1–10^6拷貝/μL）。
適配性：兼容多數(shù)商業(yè)DNA提取試劑盒，支持20μL反應(yīng)體系，50次檢測/盒。
組分清單
| 成分 | 規(guī)格 | 保存條件 |
| qPCR緩沖液 | 500 μL | -20℃避光 |
| 酶混合液 | 50 μL | -20℃避光 |
| 模板稀釋液 | 1 mL | -20℃ |
| 引物-探針干粉 | 50 T | -20℃干燥 |
| 陽性對照（10^7拷貝/μL） | 50 μL | 單獨存放，-20℃ |
操作流程
1. 樣本制備
樣本類型：食品、血液（EDTA抗凝）、糞便、病灶滲出物等。
DNA提?。航ㄗh使用商業(yè)提取試劑盒，避免交叉污染。
2. 標準曲線制備（定量分析）
取6支離心管，標記為1–6，每管加入45 μL稀釋液。
梯度稀釋陽性對照（10^7拷貝/μL起始），依次獲得10^6–10^1拷貝/μL的標準品。
3. PCR反應(yīng)設(shè)置
體系：20 μL/反應(yīng)（含2 μL模板）。
程序：
逆轉(zhuǎn)錄（如適用）：50℃ 10 min
預(yù)變性：95℃ 10 min
擴增（40循環(huán)）：95℃ 15 sec → 60℃ 60 sec（采集FAM信號）
4. 數(shù)據(jù)分析
定量：以標準曲線log值為橫軸，Ct值為縱軸，計算樣本濃度。
定性：
陽性：Ct ≤ 35，典型擴增曲線；
陰性：Ct ≥ 38或無信號；
可疑（35 < Ct < 38）：需復(fù)測確認。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴增需在獨立區(qū)域進行，避免污染。
質(zhì)量控制：每次實驗需包含陰/陽性對照。
保存與運輸：-20℃保存，避免反復(fù)凍融；運輸需使用冰袋（2–8℃）。
局限性：
檢測結(jié)果受樣本質(zhì)量、提取效率及病原體變異影響；
僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
技術(shù)參數(shù)
檢測限：≤10拷貝/μL
有效期：12個月（-20℃）
適用儀器：兼容主流熒光定量PCR儀（如ABI 7500、Bio-Rad CFX等）。
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關(guān)鍵字： 立枯絲核菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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