羊駝腎細(xì)胞培養(yǎng)中，常見(jiàn)污染按來(lái)源可分為?微生物污染、化學(xué)污染、細(xì)胞交叉污染?三大類，其中微生物污染發(fā)生率最高，具體如下：
一、最常見(jiàn)：微生物污染
占細(xì)胞培養(yǎng)污染的90%以上，又可細(xì)分為三類：
?細(xì)菌污染?：最容易發(fā)生，操作不規(guī)范、耗材滅菌不徹底是主要原因
典型特征：培養(yǎng)基地1~2天內(nèi)快速變黃渾濁，顯微鏡下可見(jiàn)大量分散的球狀/桿狀顆粒，細(xì)胞貼壁被抑制，大量死亡漂?。?/span>
常見(jiàn)菌種：大腸桿菌、葡萄球菌、枯草芽孢桿菌。
?真菌污染?：多由環(huán)境潮濕、培養(yǎng)箱水盤未定期清潔引發(fā)，春夏發(fā)生率更高
典型特征：培養(yǎng)基中可見(jiàn)白色/淡黃色絮狀菌絲漂浮，早期培養(yǎng)基渾濁不明顯，后期菌絲擴(kuò)散后細(xì)胞大面積死亡；
常見(jiàn)菌種：酵母菌、霉菌（如青霉菌、曲霉菌）。
?支原體污染?：最隱蔽的"隱形污染"，常規(guī)肉眼觀察無(wú)法發(fā)現(xiàn)，會(huì)緩慢損傷細(xì)胞
典型特征：細(xì)胞增殖變慢、形態(tài)異常，碎片增多，但培養(yǎng)基不渾濁，長(zhǎng)期污染會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞逐漸凋亡，多數(shù)是細(xì)胞引入時(shí)自帶或操作交叉污染帶來(lái)。
二、化學(xué)污染
多來(lái)自試劑、耗材引入，占比約5%~10%：
常見(jiàn)類型：培養(yǎng)基配制時(shí)重金屬殘留、血清內(nèi)毒素超標(biāo)、耗材殘留的消毒劑/塑化劑、清洗用水中的雜質(zhì)；
影響：會(huì)緩慢降低細(xì)胞活力，導(dǎo)致細(xì)胞貼壁差、增殖停滯，多數(shù)是實(shí)驗(yàn)原料不合格引發(fā)。
三、細(xì)胞交叉污染
多操作時(shí)的人為失誤引發(fā)，占比約2%~5%：
常見(jiàn)場(chǎng)景：同時(shí)操作多種細(xì)胞時(shí)，槍頭、試劑交叉使用，導(dǎo)致其他細(xì)胞混入羊駝腎細(xì)胞，比如誤混入其他腫瘤細(xì)胞后，雜細(xì)胞增殖速度快，會(huì)逐漸覆蓋壓制原有羊駝腎細(xì)胞；
危害：導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果完全錯(cuò)誤，后期很難發(fā)現(xiàn)，需要通過(guò)STR鑒定才能確認(rèn)。
其中?細(xì)菌污染和支原體污染是羊駝原代腎細(xì)胞培養(yǎng)中最常遇到的污染類型，原代分離時(shí)組織沖洗不徹底極易引入?。