在體外診斷(In Vitro Diagnostics,IVD)研發(fā)、抗體藥物開發(fā)、免疫機(jī)制研究、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型實(shí)驗(yàn)中，血清基質(zhì)干擾一直是困擾科研人員的核心痛點(diǎn)。內(nèi)源性免疫球蛋白G（IgG）的存在，會(huì)直接遮蔽目標(biāo)檢測(cè)信號(hào)、干擾抗原抗體反應(yīng)、導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)偏差、重復(fù)性差，大幅拖累研發(fā)與實(shí)驗(yàn)效率。為破解行業(yè)技術(shù)瓶頸，IPHASE作為體外研究生物試劑引領(lǐng)者，利用親和層析法原理，重磅推出去除IgG人血清（IgG-depleted Human Serum）和去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）定制化生物基質(zhì)產(chǎn)品！依托成熟的基質(zhì)凈化技術(shù)體系，精準(zhǔn)剔除血清內(nèi)源性IgG干擾因子，完整保留血清原有生物活性與基礎(chǔ)組分，為免疫實(shí)驗(yàn)、IVD試劑開發(fā)、藥物篩選提供高純度、高穩(wěn)定性的優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)基底，填補(bǔ)國(guó)內(nèi)本土高端去IgG血清產(chǎn)品空白。

圖片來源：參考文獻(xiàn)【1】

01? ? 去除IgG血清的重要性

血清是生命科學(xué)、體外診斷（In Vitro Diagnostics,IVD）領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛的生物樣本之一，其內(nèi)含的各類活性組分可真實(shí)還原機(jī)體生理、病理狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)參考價(jià)值極高。但天然人血清、食蟹猴血清中富含IgG型免疫球蛋白，也是各類免疫檢測(cè)、抗體實(shí)驗(yàn)最核心的干擾源，例如：與檢測(cè)試劑中的抗體發(fā)生非特異性結(jié)合、干擾ELISA、CLIA等免疫檢測(cè)信號(hào)、影響生物標(biāo)志物的準(zhǔn)確性評(píng)估及增加背景噪音，降低檢測(cè)靈敏度等。

在人源樣本與非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物模型研究中，IgG含量及結(jié)構(gòu)差異均可能影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可比性與穩(wěn)定性。尤其是食蟹猴，因其生理結(jié)構(gòu)、免疫機(jī)制與人類高度同源，是非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、新藥臨床前研究、免疫診斷開發(fā)的核心模型。但天然人血清及食蟹猴血清中的內(nèi)源性IgG，會(huì)嚴(yán)重干擾抗體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、靶點(diǎn)檢測(cè)、血清學(xué)分析，長(zhǎng)期以來國(guó)內(nèi)科研只能依賴進(jìn)口去IgG血清產(chǎn)品，成本高昂、供貨周期長(zhǎng)、批次穩(wěn)定性差，極大限制實(shí)驗(yàn)進(jìn)度。

因此，開發(fā)并制備去除IgG的血清（IgG-depleted Serum）基質(zhì)，已成為生物分析與藥物研發(fā)中的關(guān)鍵需求。常規(guī)實(shí)驗(yàn)方案中，傳統(tǒng)透析法、普通吸附法、有機(jī)溶劑萃取法，要么IgG去除效率低、選擇性差，無法精準(zhǔn)富集剔除IgG，還會(huì)破壞血清補(bǔ)體、細(xì)胞因子、白蛋白等有效活性成分；要么操作繁瑣、耗時(shí)久，無法適配大批量研發(fā)實(shí)驗(yàn)需求，始終無法實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)、高效、溫和的基質(zhì)凈化。

02? ? 去除IgG血清的制備方法

去除血清中的內(nèi)源性IgG，是制備高靈敏度免疫檢測(cè)基質(zhì)的核心步驟。其主要目標(biāo)是最大化去除IgG的同時(shí)，最小化對(duì)其他血清成分的影響和樣品的稀釋。目前針對(duì)人源及食蟹猴血清中IgG的去除，常用方法主要包括以下幾類：

親和層析法（Protein A/G）：利用Protein A/G與IgG Fc段的高親和力特異性結(jié)合。

優(yōu)點(diǎn)：黃金標(biāo)準(zhǔn)。去除效率極高(>99%)，特異性好，條件溫和。

缺點(diǎn)：成本較高，需要色譜設(shè)備，可能需處理柱再生。

適用場(chǎng)景：大規(guī)模、高質(zhì)量制備標(biāo)準(zhǔn)基質(zhì)。

免疫沉淀法：使用抗IgG抗體與血清孵育，形成沉淀后離心去除。

優(yōu)點(diǎn)：特異性高，去除徹底。

缺點(diǎn)：成本高昂，可能引入抗體干擾，操作較繁瑣。

適用場(chǎng)景：小規(guī)模、對(duì)特異性要求極高的實(shí)驗(yàn)。

多聚物沉淀法：加入辛酸、硫酸銨等使IgG沉淀。

優(yōu)點(diǎn)：成本極低，操作簡(jiǎn)單快速。

缺點(diǎn)：特異性差，共沉淀其他蛋白，樣品稀釋/變性。

適用場(chǎng)景：小規(guī)模、對(duì)特異性要求極高的實(shí)驗(yàn)。

商業(yè)試劑盒法：預(yù)包裝的親和離心柱或磁珠。

優(yōu)點(diǎn)：方便快捷，重復(fù)性好，無需自行摸索條件。

缺點(diǎn)：?jiǎn)未纬杀咀罡?，通量有限?/span>

適用場(chǎng)景：實(shí)驗(yàn)室常規(guī)小規(guī)模制備。

膜分離/超濾法：基于分子量截留。

優(yōu)點(diǎn)：不引入化學(xué)試劑。

缺點(diǎn)：可能影響小分子結(jié)合狀態(tài)。

適用場(chǎng)景：小規(guī)模、對(duì)特異性要求不高、結(jié)構(gòu)影響不大的實(shí)驗(yàn)。

對(duì)于絕大多數(shù)需要高靈敏度免疫分析的場(chǎng)景，基于Protein G的親和層析法是制備高質(zhì)量IgG去除人血清（IgG-depleted Human Serum）和去除IgG食蟹猴血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）的首選方法。其核心在于適度的樣品稀釋、低速上樣、流穿液重復(fù)上樣以及嚴(yán)謹(jǐn)?shù)暮筇幚砼c質(zhì)控。通過此方法獲得的基質(zhì)，能從根本上解除內(nèi)源性IgG對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)的干擾，為后續(xù)獲得可靠的藥代動(dòng)力學(xué)和免疫原性數(shù)據(jù)奠定堅(jiān)實(shí)基礎(chǔ)。

03? ? IPHASE產(chǎn)品

綜上所述，IPHASE作為體外研究生物試劑引領(lǐng)者，以親和層析法為生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)，成功生產(chǎn)了去除食蟹猴IgG血清（IgG-depleted Cynomolgus Serum）及去除人IgG血清（IgG-depleted Human Serum）和去除人IG血漿（IgG-depleted Human Plasma）服務(wù)，為免疫實(shí)驗(yàn)、IVD試劑開發(fā)、藥物篩選提供高純度、高穩(wěn)定性的優(yōu)質(zhì)實(shí)驗(yàn)基底。

除去除IgG血清（IgG-depleted Serum）及純化IgG（Purified IgG）等特殊基質(zhì)外，IPHASE常規(guī)多種屬、多規(guī)格的空白血清及血漿基質(zhì)種類齊全，真正做到了為客戶提供“一站式”血液類樣本提供服務(wù)。同時(shí)，IPHASE也含有糞便、尿液、房水等多類型空白生物基質(zhì)，以供不同需求的客戶選用。

Keywords：食蟹猴IgG；食蟹猴血清；人血清；去除IgG血清；去除IgG人血清；去除IgG食蟹猴血清；純化食蟹猴IgG；純化人IgG；親和層析法；體外診斷；Cynomolgus IgG；Cynomolgus serum；Human serum; IgG-depleted Human Serum; IgG-depleted Cynomolgus Serum；Purified Cynomolgus IgG; Purified Human IgG; In Vitro Diagnostics,IVD;

參考文獻(xiàn)【1】Sensi, S. and Goebel, A. (2022). Human Auto-IgG Purification from High Volume Serum Sample by Protein G Affinity Purification. Bio-protocol 12(23): e4562. DOI: 10.21769/BioProtoc.4562.