本文摘要:介紹人原代肝細(xì)胞(PHH)、Kupffer細(xì)胞、星狀細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞及配套專用培養(yǎng)基,為藥物代謝、肝毒性檢測(cè)、肝病研究提供可靠的細(xì)胞模型解決方案。
關(guān)鍵詞:人原代肝細(xì)胞、PHH、人肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞培養(yǎng)基、藥物肝毒性檢測(cè)、MASH模型、LifeNet Health
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一、進(jìn)口人原代肝細(xì)胞選型主要標(biāo)準(zhǔn)
人原代肝細(xì)胞是藥物研發(fā)中評(píng)估代謝穩(wěn)定性、肝毒性和藥物相互作用的金標(biāo)準(zhǔn)模型。優(yōu)質(zhì)進(jìn)口肝細(xì)胞需滿足以下核心要求:
·復(fù)蘇后存活率高、貼壁能力強(qiáng)
·保留完整的CYP450酶活性和代謝功能
·批次間性能穩(wěn)定,實(shí)驗(yàn)重復(fù)性好
·提供詳盡的質(zhì)檢報(bào)告和供體信息
·支持疾病模型研究(如NAFLD/NASH)
LifeNet Health憑借嚴(yán)格的供體篩選、成熟的分離技術(shù)和完善的質(zhì)量控制體系,成為科研和制藥領(lǐng)域備受信賴的品牌。
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二、LifeNet Health肝臟細(xì)胞產(chǎn)品核心優(yōu)勢(shì)
2.1豐富的細(xì)胞資源與疾病模型覆蓋
·覆蓋全年齡階段:新生兒、兒童、青少年及成人肝細(xì)胞
·提供健康與疾病狀態(tài)細(xì)胞:包括不同階段MAFLD/MASH、脂肪肝、肝硬化等模型
·可提供同一供體的同源匹配細(xì)胞:肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞+肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞+肝組織樣本
2.2貼壁周期與穩(wěn)定功能
·短期貼壁型:穩(wěn)定培養(yǎng)1-4天,適用于快速代謝實(shí)驗(yàn)
·中期貼壁型:穩(wěn)定培養(yǎng)5-9天,支持酶誘導(dǎo)研究,器官芯片等多培養(yǎng)體系
·長(zhǎng)期貼壁型:穩(wěn)定貼壁長(zhǎng)達(dá)14天,慢代謝研究,滿足長(zhǎng)期毒性實(shí)驗(yàn)需求
2.3嚴(yán)格的質(zhì)量控制與詳盡質(zhì)檢
每批細(xì)胞均經(jīng)過全面表征檢測(cè),隨貨提供完整的質(zhì)檢報(bào)告(CoA),包含:
·細(xì)胞存活率、產(chǎn)量、貼壁率
·CYP1A2、CYP2B6、CYP2C9、CYP3A4等主要代謝酶活性
·112種代謝酶和肝病相關(guān)基因分型
·供體病史、BMI、肝功能指標(biāo)及病理學(xué)評(píng)分
·細(xì)菌、真菌、支原體及傳染病(HIV、HBV、HCV等)檢測(cè)結(jié)果
2.4專屬配套培養(yǎng)基與技術(shù)支持
提供經(jīng)優(yōu)化的肝細(xì)胞專用復(fù)蘇、鋪板和維持培養(yǎng)基,大幅提升細(xì)胞存活率和功能穩(wěn)定性。專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)提供全程實(shí)驗(yàn)指導(dǎo)和方案優(yōu)化服務(wù)。
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三、全系列肝臟細(xì)胞產(chǎn)品詳解
3.1人原代肝細(xì)胞(PHH)
人原代肝細(xì)胞是藥物研發(fā)中普遍應(yīng)用的細(xì)胞模型,LifeNet Health提供多種類型以滿足不同實(shí)驗(yàn)需求:
3.1.1成人懸浮型與短期貼壁型
·適用場(chǎng)景:藥物代謝穩(wěn)定性、內(nèi)在清除率測(cè)定
·核心特點(diǎn):通過所有主要I/II相代謝酶活性表征
·短期貼壁細(xì)胞:1-4天
3.1.2成人中期與長(zhǎng)期貼壁型
·適用場(chǎng)景:藥物酶誘導(dǎo)、藥物相互作用、長(zhǎng)期肝毒性檢測(cè)
·核心特點(diǎn):驗(yàn)證對(duì)CYP1A2、CYP2B6、CYP3A4誘導(dǎo)劑的響應(yīng)
·貼壁周期:中期5-9天,長(zhǎng)期10-14天
3.1.3高BMI/MAFLD/MASH肝細(xì)胞
·適用場(chǎng)景:非酒精性脂肪性肝病研究、脂肪肝藥物篩選
·核心特點(diǎn):來自不同疾病階段(脂肪變性、MASH、肝硬化)供體
·附帶資料:NAS評(píng)分、纖維化分期及H&E/三色染色圖像
3.1.4新生兒/兒童/青少年肝細(xì)胞
·適用場(chǎng)景:兒科藥物研發(fā)、年齡相關(guān)性代謝差異研究
·核心特點(diǎn):反映不同發(fā)育階段的藥物代謝酶表達(dá)特征

圖1成人原代肝細(xì)胞(左:復(fù)蘇后明場(chǎng);右:培養(yǎng)第4天相差顯微鏡圖像)
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3.2人肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞
肝臟非實(shí)質(zhì)細(xì)胞占肝臟細(xì)胞總數(shù)的30%-40%,在肝臟穩(wěn)態(tài)、免疫調(diào)節(jié)和纖維化進(jìn)程中發(fā)揮關(guān)鍵作用。
3.2.1Kupffer細(xì)胞
·細(xì)胞功能:肝臟固有免疫細(xì)胞,介導(dǎo)炎癥反應(yīng)和吞噬作用
·核心特點(diǎn):驗(yàn)證脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的細(xì)胞因子響應(yīng)
·培養(yǎng)注意事項(xiàng):不增殖,無法傳代,可維持培養(yǎng)長(zhǎng)達(dá)7天
·適用場(chǎng)景:肝臟免疫研究、炎癥性肝病模型
3.2.2人原代肝星狀細(xì)胞
·細(xì)胞功能:肝臟纖維化的主要效應(yīng)細(xì)胞
·核心特點(diǎn):經(jīng)免疫細(xì)胞化學(xué)鑒定純度,可傳代培養(yǎng)
·適用場(chǎng)景:肝纖維化機(jī)制研究、抗纖維化藥物篩選
3.2.3人原代肝內(nèi)皮細(xì)胞
·細(xì)胞功能:調(diào)節(jié)肝臟微循環(huán)和物質(zhì)交換
·核心特點(diǎn):經(jīng)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)特異性標(biāo)志物表達(dá)
·適用場(chǎng)景:肝臟血管生成、藥物轉(zhuǎn)運(yùn)研究
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四、配套人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基
為獲得理想的細(xì)胞性能,推薦使用LifeNet Health專屬配套培養(yǎng)基:

圖2.LifeNet Health人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基清單
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五、標(biāo)準(zhǔn)化操作流程(以人原代肝細(xì)胞為例)
5.1細(xì)胞驗(yàn)收與儲(chǔ)存
1. 簽收后立即將凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)移至氣相液氮(-135℃至-190℃)中儲(chǔ)存
2. 切勿將細(xì)胞置于室溫或干冰上,以免標(biāo)簽開裂和細(xì)胞活性下降
3. 培養(yǎng)基驗(yàn)收后,HHTM、HHPM、HHCM基礎(chǔ)液置于2-8℃保存,補(bǔ)充劑置于-20℃保存
5.2凍存人原代肝細(xì)胞復(fù)蘇
1. 提前20-30分鐘將HHTM復(fù)蘇培養(yǎng)基置于37℃水浴預(yù)熱
2. 從液氮中快速取出凍存管,37℃水浴中快速解凍90-100秒,直至僅剩小塊冰
用70%酒精擦拭凍存管外部,將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至含49mL預(yù)熱HHTM的50mL離心管中
3. 室溫下100×g離心8分鐘,輕輕吸棄上清
4. 加入3-5mL預(yù)熱的HHPM鋪板培養(yǎng)基,輕輕重懸細(xì)胞沉淀
5. 計(jì)數(shù)細(xì)胞,確定存活率和產(chǎn)量
5.3細(xì)胞鋪板與培養(yǎng)
1. 參考每批次CoA的推薦接種密度,用HHPM培養(yǎng)基調(diào)整細(xì)胞濃度
2. 將細(xì)胞懸液加入膠原蛋白包被的培養(yǎng)板中
3. 放入37℃、5%CO?培養(yǎng)箱,按"南北向-東西向-8字形"搖晃三次使細(xì)胞均勻分布
4. 培養(yǎng)前60分鐘內(nèi),每隔15分鐘重復(fù)搖晃一次
5. 接種后2-4小時(shí),吸出培養(yǎng)液,更換為預(yù)熱的HHCM維持培養(yǎng)基
6. 每天更換新鮮的HHCM培養(yǎng)基,直至實(shí)驗(yàn)結(jié)束
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六、常見問題(FAQ)
Q1:LifeNet Health肝細(xì)胞的供體篩選標(biāo)準(zhǔn)是什么?
所有供體均經(jīng)過嚴(yán)格篩選,包括完整的病史調(diào)查、社會(huì)史調(diào)查和傳染病檢測(cè)。所有供體的HIV、HBV、HCV、梅毒和弓形蟲檢測(cè)結(jié)果均為陰性。每批細(xì)胞均提供詳細(xì)的供體信息和病理學(xué)報(bào)告。
Q2:不同類型的肝細(xì)胞應(yīng)該如何選擇?
·快速代謝實(shí)驗(yàn):選擇成人懸浮型或短期貼壁型
·酶誘導(dǎo)和藥物相互作用研究:選擇中期或長(zhǎng)期貼壁型
·MAFLD/MASH研究:選擇高BMI/MAFLD/MASH肝細(xì)胞
·兒科藥物研發(fā):選擇新生兒/兒童/青少年肝細(xì)胞
Q3:肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞可以傳代嗎?
·Kupffer細(xì)胞:不增殖,無法傳代,復(fù)蘇后直接使用
·肝星狀細(xì)胞和肝內(nèi)皮細(xì)胞:可以傳代1-2次,建議使用早期傳代細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
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七、產(chǎn)品供應(yīng)與技術(shù)支持
上海曼博生物醫(yī)藥科技有限公司是LifeNet Health中國區(qū)官方供應(yīng)商,提供全系列肝臟細(xì)胞產(chǎn)品及專業(yè)技術(shù)支持(可點(diǎn)擊訪問曼博生物官網(wǎng)查看人原代肝細(xì)胞具體解決方案):
·現(xiàn)貨供應(yīng)人原代肝細(xì)胞、肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞及配套培養(yǎng)基
·提供完整的產(chǎn)品說明書、質(zhì)檢報(bào)告和操作指南
·實(shí)驗(yàn)技術(shù)咨詢和方案優(yōu)化指導(dǎo)
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本文基于LifeNet Health公開資料由其中國提供商上海曼博生物整理,用于科研信息分享、實(shí)驗(yàn)參考等。上海曼博生物可提供LifeNet Health人原代肝細(xì)胞、PHH、人肝非實(shí)質(zhì)細(xì)胞、Kupffer細(xì)胞、肝星狀細(xì)胞、肝內(nèi)皮細(xì)胞、人原代肝細(xì)胞培養(yǎng)基、肝細(xì)胞復(fù)蘇培養(yǎng)基、鋪板培養(yǎng)基、維持培養(yǎng)基及藥物肝毒性檢測(cè)、藥物代謝、MASH模型研究相關(guān)產(chǎn)品與技術(shù)支持,助力藥物研發(fā)、肝毒性檢測(cè)、肝病機(jī)制研究及體外肝臟模型開發(fā)應(yīng)用。