iFluor 647 WGA是一種將高亮度近紅外熒光染料iFluor 647與小麥胚芽凝集素(Wheat Germ Agglutinin, WGA)通過共價偶聯(lián)形成的熒光標記探針復合物。該材料兼具凝集素的特異性糖鏈結合能力與近紅外熒光染料的高靈敏成像特性,廣泛應用于細胞表面結構標記與高分辨熒光成像研究。
從組成來看,小麥胚芽凝集素(WGA)是一種來源于小麥胚芽的天然凝集素蛋白,能夠特異性識別并結合細胞表面的N-乙酰葡糖胺(GlcNAc)以及唾液酸(sialic acid)殘基,因此常用于細胞膜糖蛋白與糖脂結構的標記分析。WGA具有良好的生物結合特異性,可在不破壞細胞結構的情況下實現(xiàn)對細胞表面糖鏈分布的可視化。
iFluor 647是一種性能優(yōu)異的近紅外熒光染料,具有較高的摩爾吸光系數(shù)與熒光量子產(chǎn)率,其激發(fā)波長通常位于約650 nm附近,發(fā)射波長約在665–680 nm范圍。相比傳統(tǒng)Cy5類染料,iFluor 647通常表現(xiàn)出更高的亮度、更好的光穩(wěn)定性以及更低的背景干擾,使其適用于高分辨率熒光成像與多通道檢測體系。
在結構上,iFluor 647 WGA通過染料的活性基團(如NHS酯衍生物)與WGA蛋白上的氨基(主要是賴氨酸殘基)發(fā)生共價偶聯(lián)反應,形成穩(wěn)定的酰胺鍵,從而將熒光信號穩(wěn)定引入蛋白骨架中。這種共價標記方式保證了熒光信號在生理條件下的穩(wěn)定性,避免染料脫落導致信號衰減。
在光學性質方面,該探針表現(xiàn)出典型的遠紅光熒光特征,具有較強的組織穿透能力與較低的自發(fā)熒光背景。iFluor 647的高亮度特性使其在低表達靶標或低豐度糖鏈結構檢測中仍可獲得清晰信號,從而提高成像靈敏度與分辨率。同時,其光穩(wěn)定性較強,適用于長時間成像實驗。
在制備方法上,iFluor 647 WGA通常通過將iFluor 647 NHS ester與WGA在弱堿性緩沖體系(pH 8.0–8.5)中進行偶聯(lián)反應制得。反應過程中,染料與蛋白表面的伯胺基團發(fā)生親核取代反應,形成穩(wěn)定共價鍵。反應完成后需通過凝膠過濾或透析去除未反應游離染料,以獲得純化的標記蛋白。
在應用方面,iFluor 647 WGA廣泛用于細胞膜與細胞表面糖鏈結構的熒光標記分析。在熒光顯微成像中,可用于觀察細胞膜輪廓、膜微區(qū)結構以及糖蛋白分布情況。在神經(jīng)生物學研究中,該探針常用于神經(jīng)元膜結構與突觸表面糖鏈的可視化。

【基本信息】:
中文名稱:?iFluor647-小麥胚芽凝集素
英文名稱:iFluor 647 WGA?
用途:科研
狀態(tài):固體/粉末/溶液
保存:冷藏
供應:西安瑞禧生物科技有限公司
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