關(guān)鍵詞:TGF-beta-1、轉(zhuǎn)化生長因子、重組蛋白、哺乳動物細胞表達、細胞培養(yǎng)、WB標準品、ELISA、纖維化、免疫調(diào)控
一、TGF-beta-1:分子結(jié)構(gòu)與生物學功能
TGF-beta-1(Transforming Growth Factor beta-1)是由 TGFB1 基因編碼的多功能細胞因子,通過結(jié)合 TGF-beta 受體(TGFBR1/TGFBR2)啟動下游 Smad 信號通路,廣泛調(diào)控細胞增殖、分化、凋亡、免疫應(yīng)答及細胞外基質(zhì)合成。本產(chǎn)品表達人 TGF-beta-1 蛋白的活性區(qū)域(Leu30-Ser390),經(jīng)哺乳動物細胞重組表達,純化后獲得高純度蛋白,具有更接近天然構(gòu)象的翻譯后修飾。
TGF-beta-1 的核心生理功能包括:
免疫調(diào)控:調(diào)節(jié) T 細胞、B 細胞、巨噬細胞等免疫細胞的分化與功能,維持免疫穩(wěn)態(tài);
纖維化與組織修復:促進成纖維細胞增殖及膠原蛋白合成,參與傷口愈合與器官纖維化進程;
腫瘤生物學關(guān)聯(lián):TGF-beta 信號通路在腫瘤發(fā)生早期起抑癌作用,晚期則促進腫瘤侵襲、轉(zhuǎn)移及免疫逃逸,是腫瘤免疫治療的重要靶點;
干細胞與發(fā)育調(diào)控:調(diào)控胚胎發(fā)育、干細胞自我更新與分化,參與骨、軟骨、血管等組織形成。
表達與分布:TGF-beta-1 廣泛存在于血小板、骨組織、胎盤、腎等組織及體液中。重組 TGF-beta-1 蛋白(哺乳動物細胞表達)可作為細胞培養(yǎng)添加劑、免疫原、WB/ELISA 標準品用于基礎(chǔ)與轉(zhuǎn)化研究,尤其適用于需要天然糖基化修飾的功能實驗。
二、TGF-beta-1 重組蛋白的科研核心價值
高質(zhì)量重組 TGF-beta-1 蛋白在多領(lǐng)域研究中具有不可替代的應(yīng)用價值:
細胞培養(yǎng)與功能研究:作為培養(yǎng)基補充因子,用于誘導成纖維細胞活化、研究上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)及細胞周期調(diào)控;
免疫調(diào)控機制研究:分析 TGF-beta-1 對 Treg 細胞分化、炎癥因子分泌的調(diào)節(jié)作用;
纖維化疾病模型:建立肝、肺、腎等器官纖維化細胞或動物模型,評估抗纖維化藥物;
免疫檢測標準品:可作為 Western Blot、ELISA 的陽性對照或定量標準品,建立檢測方法;
抗體篩選與免疫原:用于制備抗人 TGF-beta-1 單克隆/多克隆抗體,或作為免疫原進行動物免疫;
藥物開發(fā)與活性測試:在細胞水平測試候選化合物對 TGF-beta/Smad 通路的調(diào)控作用。
三、蛋白純度與質(zhì)檢驗證(SDS-PAGE)
本產(chǎn)品經(jīng) SDS-PAGE 驗證,純度 > 90%,滿足大多數(shù)免疫檢測及細胞生物學實驗要求。代表性 SDS-PAGE 結(jié)果顯示:在約 45.31 kDa 位置出現(xiàn)單一主條帶,與預測分子量一致,無明顯降解或聚集條帶。
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圖注:Lane 1:分子量標記;Lane 2:還原條件下 Recombinant Human TGF-beta-1 Protein(哺乳動物細胞表達),可見清晰單一條帶,純度>90%。
四、高品質(zhì) Recombinant Human TGF-beta-1 Protein (Mammalian Cell) 核心參數(shù)與技術(shù)優(yōu)勢
要獲得穩(wěn)定、高批間一致性的重組蛋白,選擇經(jīng)嚴格質(zhì)控的產(chǎn)品至關(guān)重要。貨號 EHB91601 具備如下核心優(yōu)勢:
核心產(chǎn)品參數(shù)
ELISA、免疫原(Immunogen)、SDS-PAGE、WB、生物活性測試(進行中)
凍干前溶液:PBS (pH 7.4),1mM EDTA,4% 海藻糖,1% 甘露醇
頻繁使用:2-8℃;長期保存:-20至-80℃,自收貨之日起12個月。避免反復凍融,使用手動除霜冰箱。
技術(shù)優(yōu)勢
哺乳動物細胞表達系統(tǒng):更接近天然蛋白的翻譯后修飾(如糖基化、二硫鍵正確配對),活性及構(gòu)象更優(yōu);
無標簽設(shè)計:天然序列,避免標簽對蛋白功能或免疫原性的潛在影響;
高純度(>90%):經(jīng) SDS-PAGE 驗證,非特異性背景低,滿足大多數(shù)免疫學實驗要求;
多應(yīng)用場景:已驗證可用于 WB、ELISA、免疫原制備,尤其適用于需要高活性蛋白的細胞功能實驗;
優(yōu)化凍干配方:含海藻糖和甘露醇作為凍干保護劑,提高蛋白長期穩(wěn)定性;PBS 體系兼容多數(shù)下游應(yīng)用。
FAQ(高頻問題)
1. 該重組蛋白的活性如何?是否適用于細胞培養(yǎng)?
目前生物活性測試正在進行中。由于采用哺乳動物細胞表達,蛋白具有天然構(gòu)象和修飾,預期活性優(yōu)于原核表達產(chǎn)品。若用于細胞增殖、分化或纖維化誘導實驗,建議先進行小劑量預實驗,或以文獻報道的活性濃度范圍(如 0.1--10 ng/mL)嘗試。如需最新活性數(shù)據(jù),可聯(lián)系技術(shù)支持獲取更新。
2. 如何復溶和保存?
打開管蓋前短暫離心,加入無菌水至推薦濃度(例如 0.1--1 mg/mL),輕輕吹打溶解,避免劇烈震蕩。復溶后可分裝凍存于 -20℃ 或 -80℃,避免反復凍融。
3. 該蛋白與天然人 TGF-beta-1 的序列差異?
本產(chǎn)品為重組人 TGF-beta-1 片段(Leu30-Ser390),包含完整的 TGF-beta-1 功能結(jié)構(gòu)域。與天然成熟 TGF-beta-1 序列一致,無額外標簽。由于采用哺乳動物細胞表達,其糖基化模式與天然蛋白高度相似。
4. 可以用于 Western Blot 的陽性對照嗎?
可以。本品已驗證適用于 WB,建議上樣量為 10--50 ng/泳道,使用抗 TGF-beta-1 抗體即可檢測。
5. 該蛋白是否適合制備抗體?
可以。本品純度 >90%,且為哺乳動物細胞表達,構(gòu)象更天然,作為免疫原制備的抗體識別天然蛋白的能力更強。推薦與弗氏佐劑混合使用。
6. 哺乳動物細胞表達的 TGF-beta-1 與大腸桿菌表達的有何區(qū)別?
哺乳動物細胞表達的產(chǎn)品具有正確的糖基化和二硫鍵,活性更高,更適用于細胞功能實驗和需要天然構(gòu)象的免疫檢測;大腸桿菌表達產(chǎn)品產(chǎn)量高、成本低,適用于 WB 標準品、免疫原等對構(gòu)象要求不高的應(yīng)用。請根據(jù)實驗目的選擇。
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