那法瑞林為功能性多肽分子,ICG 吲哚菁綠水溶性近紅外熒光基團(tuán)與多肽共價偶聯(lián)形成 Nafarelin-ICG,兼顧多肽分子靶向結(jié)合特性與近紅外熒光成像優(yōu)勢,用于多肽細(xì)胞靶向、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)基礎(chǔ)科研。
游離多肽無法實(shí)現(xiàn)活細(xì)胞原位可視化觀測,多肽結(jié)合細(xì)胞受體、胞內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的空間分布信息難以捕捉,僅能通過細(xì)胞裂解后定量檢測,缺失動態(tài)過程數(shù)據(jù)。Nafarelin-ICG 搭載 ICG 近紅外熒光,可見光區(qū)間細(xì)胞自發(fā)熒光干擾微弱,活體成像、共聚焦顯微鏡均可采集清晰熒光信號,直觀觀測多肽與細(xì)胞表面受體結(jié)合位置、胞內(nèi)內(nèi)化轉(zhuǎn)運(yùn)路徑。
水溶性 ICG 基團(tuán)優(yōu)化多肽孵育體系穩(wěn)定性,部分多肽在培養(yǎng)液中易發(fā)生聚集,ICG 親水結(jié)構(gòu)提升偶聯(lián)產(chǎn)物水溶性,細(xì)胞孵育過程均勻分散,不會析出沉淀,還原多肽與細(xì)胞受體天然結(jié)合狀態(tài),保證實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)真實(shí)可靠。
多肽受體結(jié)合特性驗(yàn)證實(shí)驗(yàn)適配該熒光偶聯(lián)試劑。設(shè)置梯度濃度 Nafarelin-ICG 與靶細(xì)胞孵育,通過熒光強(qiáng)度定量統(tǒng)計(jì)多肽結(jié)合細(xì)胞總量,對比不同競爭物質(zhì)干預(yù)下熒光信號變化,驗(yàn)證多肽細(xì)胞受體結(jié)合特異性,測定多肽分子相對結(jié)合能力,梳理多肽靶向結(jié)合基礎(chǔ)規(guī)律。
活細(xì)胞長時間時序成像實(shí)驗(yàn)可選用該試劑。ICG 熒光基團(tuán)光穩(wěn)定性優(yōu)良,長時間激光照射下熒光衰減速度平緩,可持續(xù)觀測數(shù)小時內(nèi)多肽從細(xì)胞膜轉(zhuǎn)運(yùn)至胞內(nèi)細(xì)胞器完整動態(tài),記錄不同時間節(jié)點(diǎn)胞內(nèi)多肽富集水平變化。
多肽與熒光基團(tuán)偶聯(lián)鍵穩(wěn)定,生理 pH 緩沖液中不易斷裂,不會出現(xiàn)多肽與 ICG 解離造成的熒光信號錯位,適配體外細(xì)胞孵育、近紅外熒光成像、受體結(jié)合定量分析多類實(shí)驗(yàn)體系。 本內(nèi)容僅科普 ICG 標(biāo)記那法瑞林多肽熒光科研試劑基礎(chǔ)應(yīng)用場景,僅用于體外多肽細(xì)胞交互基礎(chǔ)機(jī)理探究,不適用活體長效熒光定量觀測實(shí)驗(yàn)。
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