4 - 乙酰氨基苯甲酸屬于芳香類小分子探針骨架，CY5.5 遠(yuǎn)紅外熒光基團共價偶聯(lián)生成 4-Acetamidobenzoic acid-CY5.5，兼具小分子芳香環(huán)結(jié)合特性與低背景熒光成像能力，用于體外小分子結(jié)合、細(xì)胞轉(zhuǎn)運相關(guān)基礎(chǔ)科研。
普通芳香小分子無熒光標(biāo)記，無法直觀觀測其與細(xì)胞、蛋白的結(jié)合行為，僅能依靠色譜定量檢測，丟失空間分布、動態(tài)結(jié)合過程信息。4-Acetamidobenzoic acid-CY5.5 搭載 CY5.5 遠(yuǎn)紅外熒光，細(xì)胞自發(fā)熒光干擾極低，熒光顯微、共聚焦設(shè)備均可采集清晰信號，實時觀測小分子吸附細(xì)胞膜、內(nèi)化進(jìn)入胞內(nèi)完整過程。
CY5.5 親水結(jié)構(gòu)提升偶聯(lián)產(chǎn)物水溶性，芳香骨架本身疏水易析出，熒光基團修飾后分子整體水溶性提升，細(xì)胞培養(yǎng)液中均勻分散，無需高濃度有機溶劑助溶，避免有機溶劑對細(xì)胞生理狀態(tài)造成干擾，維持細(xì)胞正常生理活性開展孵育實驗。
小分子蛋白結(jié)合機制探究適配該熒光標(biāo)記試劑。體外構(gòu)建小分子與模型蛋白共孵育體系，通過 CY5.5 熒光信號追蹤小分子蛋白復(fù)合物，對比不同 pH、溫度條件下熒光結(jié)合強度變化，分析芳香小分子與蛋白之間相互作用的基礎(chǔ)影響因素，梳理分子結(jié)合調(diào)控規(guī)律。
多組分同步熒光成像實驗可搭配短波長熒光探針共同使用，CY5.5 光譜與 FITC、CY3 等熒光基團無重疊，多通道同步成像可區(qū)分該芳香小分子與其他胞內(nèi)標(biāo)記物分布，觀測小分子與胞內(nèi)蛋白、細(xì)胞器的共定位特征，解析小分子胞內(nèi)作用位點。
偶聯(lián)化學(xué)鍵穩(wěn)定性強，常規(guī)細(xì)胞孵育緩沖液、提取溶劑中不會發(fā)生小分子與熒光基團解離，熒光信號穩(wěn)定無偏移，適配體外蛋白互作、活細(xì)胞時序成像、小分子細(xì)胞攝取定量多類基礎(chǔ)實驗。 本篇內(nèi)容僅科普 CY5.5 標(biāo)記 4 - 乙酰氨基苯甲酸熒光科研試劑基礎(chǔ)特性與應(yīng)用，僅適用于體外芳香小分子交互基礎(chǔ)機理探索，不可直接用于批量樣本標(biāo)準(zhǔn)化熒光檢測。
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