一、產(chǎn)品概述與檢測原理
由艾美捷代理Abnova推出的猴IgE ELISA定量檢測試劑盒（貨號：KA2450）采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA），專用于舊大陸猴（Old World Monkey）血清或血漿樣本中免疫球蛋白E（IgE）的定量檢測。IgE是介導(dǎo)I型超敏反應(yīng)及抗寄生蟲免疫的關(guān)鍵抗體亞型，其水平監(jiān)測在過敏性疾病模型、寄生蟲感染研究及疫苗安全性評價(jià)中具有重要價(jià)值。本試劑盒基于雙抗體夾心原理，通過HRP標(biāo)記的檢測抗體產(chǎn)生比色信號，信號強(qiáng)度與樣本中IgE濃度呈正比，從而實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)定量。
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二、適用樣本與前處理要求
適用樣本：舊大陸猴血清或血漿。建議使用新鮮采集的樣本，避免反復(fù)凍融，以保證抗原完整性。
上樣量：每孔100 μL（需預(yù)先稀釋），建議根據(jù)預(yù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果確定最佳稀釋倍數(shù)，確保待測濃度落于標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi)。
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三、檢測性能與定量參數(shù)
校準(zhǔn)范圍：5 ~ 160 ng/mL，覆蓋舊大陸猴血清/血漿中IgE的典型生理及病理濃度區(qū)間。
檢測方法：比色法，于酶標(biāo)儀450 nm波長處讀取吸光度。
檢測類型：定量檢測，依據(jù)同步繪制的標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本濃度。
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四、標(biāo)準(zhǔn)曲線與質(zhì)控要求
每批次試劑盒提供典型標(biāo)準(zhǔn)曲線數(shù)據(jù)供參考，但請注意：該曲線僅作示意用途，不可直接用于計(jì)算未知樣本。實(shí)驗(yàn)人員須在每次檢測時(shí)同步制備新鮮的標(biāo)準(zhǔn)曲線，建議設(shè)置6~8個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品濃度梯度，并包含空白對照及質(zhì)控品。所有標(biāo)準(zhǔn)品及樣本建議設(shè)置復(fù)孔操作，以確保定量結(jié)果的準(zhǔn)確性和批間可比性。
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五、儲(chǔ)存條件與試劑穩(wěn)定性
凍干標(biāo)準(zhǔn)品：于-20°C長期保存。復(fù)溶后建議當(dāng)日使用，剩余部分請勿反復(fù)凍融。
其他組分（包被板、檢測抗體、顯色液、終止液等）：于4°C冷藏保存，避免高溫及光照。
操作前準(zhǔn)備：所有試劑使用前需平衡至室溫（20~25°C），充分混勻但避免產(chǎn)生氣泡。
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六、操作流程概覽
1. 加樣：將標(biāo)準(zhǔn)品及稀釋后的待測樣本加入對應(yīng)孔中，孵育使IgE與捕獲抗體結(jié)合；
2. 洗滌：棄去孔內(nèi)液體，洗滌去除未結(jié)合物質(zhì)；
3. 加檢測抗體：加入HRP標(biāo)記的檢測抗體，形成“捕獲抗體-IgE-檢測抗體”夾心復(fù)合物；
4. 再次洗滌：去除未結(jié)合的檢測抗體；
5. 顯色：加入底物液，避光孵育產(chǎn)生顏色反應(yīng)；
6. 終止與讀數(shù)：加入終止液，于450 nm波長處讀取吸光度。
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七、使用限制與注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅供科研用途（RUO），不可用于臨床診斷或治療。
不同批次號組分請勿混用。
操作過程中請穿戴防護(hù)裝備，避免底物液及終止液直接接觸皮膚。
試劑盒應(yīng)在有效期內(nèi)使用，過期產(chǎn)品不可保證檢測性能。
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八、典型應(yīng)用場景
本試劑盒適用于非人靈長類動(dòng)物模型中的過敏反應(yīng)研究、寄生蟲感染免疫應(yīng)答監(jiān)測、以及生物制劑（如單抗類藥物）免疫原性評估中IgE水平的動(dòng)態(tài)追蹤，為轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)及臨床前安全性評價(jià)提供可靠定量工具。
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引用文獻(xiàn)：
Single-cell transcriptomic characterization reveals the landscape of airway remodeling and inflammation in a cynomolgus monkey model of asthma.
Yingshuo Wang, Xinyan Dong, Caizhe Pan, Cihang Zhu, Hantao Qi, Yifan Wang, Hao Wei, Qiangmin Xie, Lei Wu, Huijuan Shen, Shuxian Li, Yicheng Xie
Front Immunol 2022 Nov; 13:1040442.