一、產(chǎn)品概述與靶點(diǎn)背景
細(xì)胞表面波形蛋白（Cell-Surface Vimentin，CSV）是波形蛋白在細(xì)胞膜表面的一種特殊定位形式。波形蛋白傳統(tǒng)上被認(rèn)為是中間絲蛋白，主要表達(dá)于間充質(zhì)來源的細(xì)胞胞漿內(nèi)。然而，近年研究發(fā)現(xiàn)，在腫瘤微環(huán)境及特定病理?xiàng)l件下，波形蛋白可易位至細(xì)胞膜表面，成為上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）、腫瘤轉(zhuǎn)移及免疫調(diào)控過程中的重要標(biāo)志物。由艾美捷代理Abnova推出的細(xì)胞表面波形蛋白（CSV）單克隆抗體（貨號(hào)：H00007431-MP08）為PE熒光標(biāo)記的小鼠單克隆抗體（克隆號(hào)84-1），專門識(shí)別天然構(gòu)象的人細(xì)胞表面波形蛋白，適用于活細(xì)胞表面抗原檢測(cè)。
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二、抗體特性與標(biāo)記物
免疫原：人重組波形蛋白
宿主：小鼠
亞型：IgG2b，Kappa型
熒光標(biāo)記：PE（藻紅蛋白），激發(fā)波長約488-561 nm，發(fā)射波長約575 nm，適配流式細(xì)胞儀及熒光顯微鏡的PE通道
緩沖體系：1× PBS，pH 7.4
形態(tài)：液體
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三、適用應(yīng)用方法
本抗體經(jīng)驗(yàn)證適用于：
流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry）：檢測(cè)活細(xì)胞表面CSV表達(dá)陽性率及平均熒光強(qiáng)度
免疫熒光（Immunofluorescence）：對(duì)非固定、非透化的活細(xì)胞進(jìn)行表面抗原染色，直接觀察CSV在細(xì)胞膜上的分布
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四、操作關(guān)鍵要求——極為重要
本抗體應(yīng)在細(xì)胞固定和透化之前使用，即在活細(xì)胞狀態(tài)下進(jìn)行染色，以識(shí)別天然的細(xì)胞表面構(gòu)象表位。若實(shí)驗(yàn)流程中必須進(jìn)行固定，請(qǐng)務(wù)必使用Abnova提供的專用固定液（Special Fixative），以避免常規(guī)固定劑（如多聚甲醛、甲醇等）破壞CSV的天然表位或?qū)е录訇栃?假陰性結(jié)果。
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五、典型染色結(jié)果
經(jīng)驗(yàn)證，在未固定、未透化的PANC-1（人胰腺癌細(xì)胞）上，使用本抗體進(jìn)行免疫熒光染色，可觀察到細(xì)胞膜表面清晰的CSV陽性信號(hào)（橙色，PE熒光），細(xì)胞核以DAPI復(fù)染（藍(lán)色），背景清晰，特異性良好。
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六、儲(chǔ)存條件與穩(wěn)定性
儲(chǔ)存溫度：4°C避光保存，嚴(yán)禁冷凍。
避光要求：PE熒光染料對(duì)光敏感，操作及儲(chǔ)存過程中應(yīng)盡量避免強(qiáng)光直射，使用鋁箔包裹或置于暗處。
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七、應(yīng)用場(chǎng)景建議
適用于腫瘤微環(huán)境中CSV表達(dá)研究、EMT標(biāo)志物分析、循環(huán)腫瘤細(xì)胞檢測(cè)以及活細(xì)胞表面抗原篩選等前沿課題。
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文獻(xiàn)參考：
1. LSD1 activation promotes inducible EMT programsand modulates the tumour microenvironment in breastcancer. Boulding T, McCuaig RD, Tan A, Hardy K, Wu F,Dunn J, Kalimutho M, Sutton CR, Forwood JK, Bert AG,Goodall GJ, Malik L, Yip D, Dahlstrom JE, Zafar A,Khanna KK, Rao S. Sci Rep. 2018 Jan 8;8(1):73.
2. Specific detection tool for mesenchymal and epithelialmesenchymal transformed circulating tumor cells. ArunSatelli, Shulin Li. Board Of Regents, The University OfTexas System. 2013 Mar 05. WO2014138183A1.
3. Cell-surface Vimentin: A mislocalized protein forisolating csVimentin(+) CD133(-) novel stem-likehepatocellular carcinoma cells expressing EMT markers.Mitra A, Satelli A, Xia X, Cutrera J, Mishra L, Li S. Int JCancer. 2015 Jul 15;137(2):491-6. doi:10.1002/ijc.29382. Epub 2014 Dec 18.