一、產(chǎn)品概述與檢測原理
由艾美捷代理Abnova推出的犬IgG ELISA檢測試劑盒,貨號:KA1938,采用高靈敏度的雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法,專用于犬血漿或血清樣本中免疫球蛋白G(IgG)的定量測定。IgG是犬類體液免疫應(yīng)答中最主要的抗體亞型,其濃度水平在感染監(jiān)測、疫苗免疫效果評估及自身免疫性疾病研究中具有重要臨床前參考價值。該試劑盒基于兩株高特異性抗體——捕獲抗體預(yù)包被于微孔板,HRP標記的檢測抗體構(gòu)成完整夾心體系,通過比色法產(chǎn)生與樣本IgG濃度呈正相關(guān)的穩(wěn)定信號,實現(xiàn)精準定量。
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二、適用樣本與前處理要求
適用樣本:犬血漿或血清。建議使用新鮮采集的樣本,若不能及時檢測,應(yīng)于-20°C凍存,避免反復(fù)凍融以防抗體降解。
上樣量:每孔100 μL,建議根據(jù)預(yù)實驗確定最佳稀釋倍數(shù),確保待測濃度落于標準曲線線性范圍內(nèi)。
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三、檢測性能與定量參數(shù)
校準范圍:25 ~ 800 ng/mL,覆蓋犬血清/血漿中IgG的典型生理濃度區(qū)間,滿足常規(guī)及特定模型檢測需求。
檢測下限:7.148 ng/mL,具備高度分析靈敏度,可滿足低豐度樣本的準確定量。
檢測方法:比色法,于酶標儀450 nm波長處讀取吸光度。
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四、標準曲線與質(zhì)控要求
每批次試劑盒提供典型標準曲線數(shù)據(jù),該曲線僅供示意參考,不可直接用于計算未知樣本。為保證定量準確性,實驗人員須在每次檢測時同步制備新鮮的標準曲線,建議設(shè)置6~8個標準品濃度梯度(含零濃度空白),所有標準品及待測樣本應(yīng)設(shè)置復(fù)孔操作。同時建議每板包含質(zhì)控品,以監(jiān)控實驗操作的一致性和板內(nèi)變異。
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五、儲存條件與試劑穩(wěn)定性
儲存溫度:所有組分于4°C冷藏保存,避免冷凍。
操作前準備:使用前將所有試劑平衡至室溫(20~25°C),輕輕顛倒混勻但避免劇烈振蕩產(chǎn)生氣泡。
有效期限:請在試劑盒標簽標注的有效期內(nèi)使用,過期產(chǎn)品可能導(dǎo)致信號衰減或背景增高。
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六、操作流程概覽
1. 加樣:將標準品及稀釋后的待測樣本加入對應(yīng)微孔,孵育使IgG與捕獲抗體結(jié)合;
2. 洗滌:棄液后洗滌,去除未結(jié)合物質(zhì);
3. 加檢測抗體:加入HRP標記的檢測抗體,形成“捕獲抗體-IgG-檢測抗體”夾心復(fù)合物;
4. 再次洗滌:去除游離的檢測抗體;
5. 顯色:加入底物液,避光孵育產(chǎn)生顏色反應(yīng);
6. 終止與讀數(shù):加入終止液,于450 nm波長處讀取吸光度。
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七、使用限制與注意事項
本產(chǎn)品僅供科研用途(RUO),不可用于臨床診斷或治療。
不同批號組分請勿混用,以免影響檢測性能。
操作過程中請穿戴防護裝備,避免底物液及終止液接觸皮膚。
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八、典型應(yīng)用場景
本試劑盒適用于犬類傳染病抗體水平監(jiān)測、疫苗免疫程序優(yōu)化、比較免疫學(xué)研究以及獸藥安全性評價中IgG應(yīng)答的定量評估,為獸醫(yī)科研及轉(zhuǎn)化醫(yī)學(xué)提供穩(wěn)定可靠的檢測工具。