NADP-蘋果酸脫氫酶（NADP-MDH）試劑盒說明書

分光光度法 50管/48樣 

正式測定前務必取 2-3 個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義：

MDH （EC 1.1.1.37）廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中，線粒體中 MDH 是 TCA 循環(huán)的 關鍵酶之一，催化蘋果酸形成草酰乙酸；相反，胞漿中 MDH 催化草酰乙酸形成蘋果酸。草酰乙酸是重要 的中間產物， 連接多條重要的代謝途徑。因此，MDH 在細胞多種生理活動中扮演著重要的角色，包括線 粒體的能量代謝、 蘋果酸-天冬氨酸穿梭系統(tǒng)、活性氧代謝和抗病性等。根據不同的輔酶特異性，MDH 分為 NAD-依賴的 MDH 和 NADP-依賴的 MDH， NADP-MDH 主要存在于真核細胞中。

測定原理：

NADP-MDH 催化 NADPH 還原草酰乙酸生成蘋果酸，導致 340nm 處光吸收下降。

自備儀器和用品： 

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1 ml 石英比色皿和蒸餾水。

樣本測定的準備：

1、細菌、細胞或組織樣品的制備： 細菌或培養(yǎng)細胞：先收集細菌或細胞到離心管內，離心后棄上清；按照細菌或細胞數量（10 4個）： 試劑一體積（ml）為 500~1000：1 的比例（建議 500 萬細菌或細胞加入 1ml 試劑一），超聲波破碎細菌或細胞（冰浴，功率 20％或 200W，超聲 3s，間隔 10s，重復 30 次）；8000g 4℃離心 10min，取上清置冰上 待測。 組織：按照組織質量（g）：試劑一體積(ml)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g 組織，加入 1ml 試 劑一），進行冰浴勻漿。8000g 4℃離心 10min，取上清，置冰上待測。

2、血清（漿）樣品：直接檢測。

詳細說明書請聯系吳經理：18082049515（微信同號）QQ：2574511879