產(chǎn)品簡介
GPx是一種重要的抗氧化酶，能夠清除人體內(nèi)的過氧化氫等有害物質(zhì)，在保護(hù)細(xì)胞免受自由基損傷，維護(hù)細(xì)胞內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定性。細(xì)胞內(nèi)的脂類容易和自由基發(fā)生反應(yīng)，產(chǎn)生脂類過氧化物。谷胱甘肽過氧化物酶可以利用還原型谷胱甘肽(GSH)還原脂類過氧化物，從而消除自由基的毒害作用。谷胱甘肽過氧化物酶幾乎在所有組織中都有分布。在一些病理狀況下谷胱甘肽過氧化物酶的活力會發(fā)生明顯上調(diào)或下調(diào)。
絕大部分細(xì)胞內(nèi)的GPx都是含硒的，且硒為該酶的活性中心組成部分。細(xì)胞內(nèi)也有很少量的不含硒的GPx存在。本試劑盒可以同時(shí)定量檢測含硒的和不含硒的GPx的總量。本試劑盒和谷胱甘肽過氧化物酶活性測定試劑盒(DTNB法) (BC00016)配合使用，可以定量檢測出樣品中不含硒的GPx。
產(chǎn)品特點(diǎn)
特異性良好：本試劑盒提供的有機(jī)過氧化物試劑（Cum-OOH）在沒有谷胱甘肽過氧化物酶存在的情況下不會和GSH產(chǎn)生反應(yīng)，也不會被細(xì)胞內(nèi)的過氧化氫酶催化而分解。因而可以較為特異地檢測出谷胱甘肽過氧化物酶的活力。
檢測原理
總谷胱甘肽過氧化物酶活性測定試劑盒(DTNB法)是一種利用比色法檢測谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）的活性。在GSH相對比較充足并有足量有機(jī)過氧化物存在的情況下，GPx可以催化GSH生成GSSG。剩余的GSH可以和生色底物DTNB反應(yīng)產(chǎn)生GSSG和黃色的TNB。此時(shí)，GPx活性的高低決定了剩余的GSH的量，從而決定了黃色TNB形成的量，因此TNB的形成量和GPx的活力負(fù)相關(guān)。通過測定黃色TNB的吸光度就可以計(jì)算出谷胱甘肽過氧化物酶的活性。
由于Cum-OOH可以同時(shí)作為含硒和不含硒的谷胱甘肽過氧化物酶的底物，所以本試劑盒可以測定含硒和不含硒的谷胱甘肽過氧化物酶總量。
產(chǎn)品組分
產(chǎn)品名稱 | 包裝規(guī)格（100T） | 保存方式 |
樣品勻漿液 | 100ml | -20℃ |
谷胱甘肽過氧化物酶檢測緩沖液 | 50ml | -20℃ |
還原型谷胱甘肽(GSH) | 4.5mg | -20℃，配制成溶液，分裝后-20oC保存。 |
DTNB | 4.5mg | -20℃，配制成溶液，分裝后-20oC保存。 |
DMSO | 1.5ml | -20℃ |
過氧化物試劑(Cum-OOH) | 200μl | -20℃ |
96 孔酶標(biāo)板 | 1 板 | RT |
96 孔覆膜 | 2 張 | RT |
保存條件
未拆封的試劑盒可在 -20℃保存12個(gè)月。
注意事項(xiàng)
1. 本試劑盒檢測時(shí)涉及氧化還原反應(yīng)，因此所有氧化劑或還原劑都會干擾本試劑盒的測定。如果在樣品中的還原劑無法避免，例如DTT、巰基乙醇等，則這些還原劑的總濃度至少低于0.1mM。0.15mM的DTT可以抑制40%的酶活力。
2. 常用的Triton X-100、Tween-20等去垢劑都含有較高水平的過氧化物，會影響本試劑盒的測定。如果必須使用這些去垢劑，最好使用純度較高并注明含較低過氧化物的去垢劑。
3. 反應(yīng)體系中加入DTNB溶液后，可以在極短的時(shí)間內(nèi)消耗掉剩余的GSH，使GPx催化的反應(yīng)終止。因此計(jì)算酶活力時(shí)，僅使用DTNB加入之前的反應(yīng)時(shí)間來進(jìn)行計(jì)算即可。 樣品可以立即測定，也可以-70oC凍存待以后測定。
4. 一定要嚴(yán)格控制反應(yīng)時(shí)的溫度為25oC，否則會引起較多誤差。
5. 與NADPH法相比，本試劑盒使用的DTNB比NADPH更加穩(wěn)定，操作更為簡單，但NADPH法的靈敏度更高。研究人員可以根據(jù)樣品中谷胱甘肽過氧化物酶的含量及實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行選擇。
6. 本產(chǎn)品僅限于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
關(guān)鍵字： Total;Glutathione;Peroxidase;T-GSH-Px;Activity;Assay;Kit;DTNB;總谷胱甘肽過氧化物酶活性;DTNB法;試劑盒
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