單寧酶(TAN)測(cè)定試劑盒/分光光度法/24樣
測(cè)定意義:
單寧酶全稱是單寧酯酰水解酶(Tannase ,EC 3.1.1.20),它可以水解沒食子酸單寧中的酯鍵和縮酚羧鍵,生成沒食子酸和葡萄。
測(cè)定原理:
使用抗氧化劑沒食子酸丙酯(PG)作為單寧酶酶促反應(yīng)的底物,在 270nn 下測(cè)定底物 PG 反應(yīng)前后的光密度變化,計(jì)算單寧酶酶活力。
自備儀器和用品:
紫外分光光度計(jì)、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1 mL 石英比色皿、研缽、冰、蒸餾水。測(cè)定步驟:加樣表
試劑名稱(μL)
對(duì)照管
測(cè)定管
95℃水浴 5min 后滅活的粗酶液
50
粗酶液
試劑二
混勻,40℃準(zhǔn)確保溫 10 min 后,置 95℃水浴中 10 min(蓋緊,防止水分散失),冷卻
試劑一
900
混勻,270nm 處讀取各管吸光值。計(jì)算ΔA=A 對(duì)照-A 測(cè)定。每個(gè)測(cè)定管需設(shè)個(gè)一個(gè)對(duì)照管。
注 意:
可以在不同對(duì)照管中加入不同樣品的粗酶液,然后集中進(jìn)行 5min95℃沸水浴處理。
上海酶聯(lián)生物科技有限公司
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