預(yù)期用途
基于TaqMan探針?lè)晒舛縋CR技術(shù)，專(zhuān)用于石斛（Dendrobium spp.）的核酸定性及定量檢測(cè)，適用于科研用途（非臨床）。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 石斛探針?lè)?/span>PCR鑒定試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Herba Dendrobii Probe-based PCR Identification Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類(lèi)型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4976 |
檢驗(yàn)原理
采用實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)石斛基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物及探針。探針5'端標(biāo)記熒光報(bào)告基團(tuán)，3'端標(biāo)記淬滅基團(tuán)。PCR擴(kuò)增時(shí)，Taq酶切割探針釋放熒光信號(hào)，通過(guò)監(jiān)測(cè)熒光強(qiáng)度實(shí)現(xiàn)靶序列的定性與定量分析。
試劑盒組成
| 組分 | 規(guī)格 | 功能說(shuō)明 |
| 石斛擴(kuò)增液 | 25μL×1管 | 含特異性引物及探針 |
| 石斛反應(yīng)液 | 975μL×1管 | PCR主反應(yīng)混合液 |
| 陽(yáng)性質(zhì)控品 | 50μL×1管 | 1×10?拷貝/μL石斛DNA片段 |
| 陰性質(zhì)控品 | 50μL×1管 | 無(wú)核酸酶水 |
| 說(shuō)明書(shū) | 1份 | 操作指南 |
注意：不同批號(hào)組分不可混用，避免反復(fù)凍融（≤7次）。
儲(chǔ)存及有效期
儲(chǔ)存條件：-20℃±5℃避光保存。
有效期：12個(gè)月（未開(kāi)封）。
適用儀器
支持ABI系列、Bio-Rad、LightCycler等熒光定量PCR儀（需配備FAM通道）。
樣本要求
樣本類(lèi)型：植物組織、DNA提取物（建議使用商品化提取試劑盒）。
保存與運(yùn)輸：短期-20℃保存，長(zhǎng)期-70℃；運(yùn)輸需2~8℃冰袋，避免反復(fù)凍融。
操作步驟
1. 樣本DNA提取
使用無(wú)核酸酶污染的提取方法，推薦配套病毒基因組DNA提取試劑盒。
2. 試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
按N（樣本數(shù)+2對(duì)照）計(jì)算反應(yīng)管數(shù)，每管加入：
石斛反應(yīng)液：19.5μL
石斛擴(kuò)增液：0.5μL
分裝后轉(zhuǎn)移至樣本處理區(qū)。
3. 加樣（樣本處理區(qū)）
分別加入5μL待測(cè)DNA、陽(yáng)性質(zhì)控品、陰性質(zhì)控品至對(duì)應(yīng)反應(yīng)管。
4. PCR擴(kuò)增（擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)程序：
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 3 min | 1 |
| 擴(kuò)增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 55-60℃ | 30 sec | 40 |
5. 結(jié)果分析
陽(yáng)性判定：Ct值≤35；
陰性判定：Ct值≥40或無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn)；
可疑結(jié)果：35<Ct<40需復(fù)測(cè)。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作（試劑配制、樣本處理、擴(kuò)增），避免交叉污染。
使用一次性耗材，實(shí)驗(yàn)后消毒工作臺(tái)。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
公司正在出售的產(chǎn)品
流感病毒N9亞型PCR檢測(cè)試劑盒（熒光PCR法） | 人精子蛋白17ELISA試劑盒 |
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鳥(niǎo)源性成分探針?lè)晒舛?/span>PCR試劑盒 | 阿米巴檢測(cè)試劑盒 Amebiasis ELISA Kit |
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關(guān)鍵字： 石斛;探針?lè)?PCR鑒定試劑盒;
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