產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)開發(fā)，專用于檢測牛附紅細(xì)胞體（Eperythrozoon wenyoni，又稱牛嗜血支原體）的核酸。適用于科研及臨床樣本的定性或定量分析，具有高靈敏度、高特異性和操作簡便的特點(diǎn)。
產(chǎn)品名稱 | 牛附紅細(xì)胞體（牛嗜血支原體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Bovine Hemoplasma (Haemoplasma bovis) Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3099 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：用戶僅需提供待測DNA模板，試劑盒包含預(yù)混反應(yīng)體系，無需額外優(yōu)化。
高靈敏度與特異性：引物及探針針對(duì)牛附紅細(xì)胞體保守序列設(shè)計(jì)，可有效避免與其他病原體的交叉反應(yīng)。
雙重檢測模式：支持定性和定量分析，定量線性范圍達(dá)5個(gè)數(shù)量級(jí)。
質(zhì)量控制：提供陽性質(zhì)控品和陰性質(zhì)控品，便于結(jié)果判讀及排除假陰性。
兼容性廣：適配主流熒光定量PCR儀（如ABI 7500、Bio-Rad CFX、LightCycler480等）。
試劑盒組成
預(yù)混PCR反應(yīng)液（含染料、dNTPs、酶等）
陽性質(zhì)控品（標(biāo)準(zhǔn)曲線模板）
陰性質(zhì)控品（無核酸水）
復(fù)溶劑（凍干粉試劑適用）
操作步驟
1. 樣本制備
使用兼容的核酸提取試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
2. 反應(yīng)體系配制（20 μL體系）
| 組分 | 體積（μL） |
| 預(yù)混PCR反應(yīng)液 | 15 |
| 模板DNA | 5 |
3. PCR擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度/時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃, 2 min | 1 |
| 變性 | 95℃, 10 s | 45 |
| 退火/延伸 | 60℃, 35 s | |
注：熒光信號(hào)采集設(shè)置為60℃延伸階段（FAM通道）。
4. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測：以陽性質(zhì)控品log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算待測樣本濃度。
定性檢測：Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈S型判為陽性。
注意事項(xiàng)
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月；避免反復(fù)凍融。
防污染措施：分區(qū)操作（樣本制備區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），使用無菌耗材。
儀器適配：若使用ABI 7500等需ROX校正的儀器，需按說明書添加對(duì)照染料。
適用范圍
科研用途：流行病學(xué)調(diào)查、病原載量監(jiān)測。
臨床輔助診斷：疑似感染病例的病原學(xué)確認(rèn)。
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關(guān)鍵字： 牛附紅細(xì)胞體（牛嗜血支原體）;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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