微黃細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 微黃細(xì)頸線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Capillaria philippinensis Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR3667 |
檢驗(yàn)原理
采用SYBR Green染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對Nematodirus helvetianus基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物，通過體外擴(kuò)增檢測目標(biāo)核酸。反應(yīng)體系中若存在微黃細(xì)頸線蟲核酸模板，PCR擴(kuò)增過程中釋放的熒光信號可被儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測，實(shí)現(xiàn)定性或定量分析。
試劑組成
微黃細(xì)頸線蟲擴(kuò)增液（50μL×1管）
熒光PCR專用模板稀釋液
陽性對照（1×10^8拷貝/μL DNA片段）
10×ROX參比染料（根據(jù)機(jī)型適配）
使用方法
1. 陽性對照稀釋（以10^2~10^7拷貝/μL梯度為例）
注意事項(xiàng)：操作需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染。
步驟：
標(biāo)記6支離心管為7、6、5、4、3、2號。
每管加入45μL熒光PCR專用模板稀釋液（使用帶濾芯槍頭）。
7號管加入5μL陽性對照（1×10^8拷貝/μL），渦旋震蕩1分鐘，得到1×10^7拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品，冰上保存。
依次梯度稀釋至6號管（1×10^6拷貝/μL）、5號管（1×10^5拷貝/μL），直至2號管（1×10^2拷貝/μL）。每步需更換槍頭并充分混勻。
2. PCR反應(yīng)體系配制
按20μL體系配制：
擴(kuò)增液10μL
模板DNA 2μL
ROX染料（按儀器要求添加）
補(bǔ)足無核酸酶水至終體積。
注意事項(xiàng)
避免反復(fù)凍融試劑，分裝保存。
實(shí)驗(yàn)廢棄物需按生物安全規(guī)范處理。
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關(guān)鍵字： 微黃細(xì)頸線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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