柏氏血矛線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 柏氏血矛線蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Haemonchus placei Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3806 |
產(chǎn)品概述
柏氏血矛線蟲(Haemonchus placei)是一種主要寄生于牛、羊等反芻動(dòng)物真胃內(nèi)的線蟲，可引起宿主貧血、消瘦甚至死亡。本試劑盒采用染料法熒光定量PCR技術(shù)，專為檢測和定量分析樣本中的柏氏血矛線蟲核酸而設(shè)計(jì)，適用于科研用途。
技術(shù)原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法熒光定量PCR技術(shù)：
特異性引物針對(duì)柏氏血矛線蟲基因組中的高度保守區(qū)域(如ITS區(qū)域或線粒體基因)設(shè)計(jì)
SYBR Green染料可非特異性結(jié)合所有雙鏈DNA，在PCR擴(kuò)增過程中隨產(chǎn)物積累而熒光信號(hào)增強(qiáng)
儀器實(shí)時(shí)監(jiān)測熒光信號(hào)變化，通過Ct值(循環(huán)閾值)判斷樣本中是否含有目標(biāo)核酸
通過標(biāo)準(zhǔn)曲線可計(jì)算初始模板拷貝數(shù)，實(shí)現(xiàn)定量分析
產(chǎn)品規(guī)格
規(guī)格：50次反應(yīng)(50T)
保存條件：-20℃避光保存
有效期：12個(gè)月
主要組分
| 組分名稱 | 規(guī)格 | 主要功能 |
| 2×SYBR qPCR Mix | 500μL-1mL | 含Taq酶、dNTPs、緩沖液、Mg2?等 |
| PCR引物混合液 | 100μL | 特異性擴(kuò)增柏氏血矛線蟲目標(biāo)片段 |
| 陽性對(duì)照(1×10?拷貝/μL) | 50μL | 含目的基因片段的質(zhì)?；駾NA |
| 模板稀釋液 | 1mL | 用于稀釋陽性對(duì)照或溶解DNA模板 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
高靈敏度：可檢測低至103拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)品
操作簡便：預(yù)混液設(shè)計(jì)，減少操作步驟
穩(wěn)定性好：-20℃保存12個(gè)月性能穩(wěn)定
兼容性強(qiáng)：適用于多種熒光定量PCR儀
操作流程
樣本DNA制備
使用自選方法純化樣本DNA
設(shè)置陽性對(duì)照和陰性對(duì)照
短期保存于2-8℃，長期保存于-70℃(避免反復(fù)凍融)
PCR反應(yīng)體系配置(20μL體系)
2×SYBR qPCR Mix：10μL
引物混合液：2μL
模板DNA：8μL
總計(jì)：20μL
擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
擴(kuò)增循環(huán)(40個(gè)循環(huán))：
95℃ 15秒
60℃ 30秒(采集熒光信號(hào))
熔解曲線分析：60-95℃，每0.5℃增加，停留5秒
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷
操作時(shí)需分區(qū)進(jìn)行，避免交叉污染
建議使用無核酸酶耗材
反應(yīng)體系配制應(yīng)在冰上進(jìn)行
熔解曲線分析可驗(yàn)證產(chǎn)物特異性
質(zhì)量控制
陽性對(duì)照Ct值應(yīng)≤30
陰性對(duì)照無擴(kuò)增曲線
熔解曲線應(yīng)為單一峰
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關(guān)鍵字： 柏氏血矛線蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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