旋毛蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱(chēng) | 旋毛蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Trichinella spiralis Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3824 |
包裝規(guī)格
檢測(cè)次數(shù)：50次/盒
主要成分及規(guī)格：
試劑一（PCR MagicMix 3.0）：1 mL（紅蓋）
試劑二（超純水）：1 mL（亮黃色）
試劑三（引物混合液）：100 μL（白蓋）
試劑四（陽(yáng)性對(duì)照，1×10^8 拷貝/μL）：50 μL（黃蓋）
說(shuō)明書(shū)：1份
檢驗(yàn)原理
采用SYBR Green染料法實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)，針對(duì)旋毛蟲(chóng)屬（Trichinella spp.）基因保守區(qū)域設(shè)計(jì)特異性引物，通過(guò)熒光信號(hào)實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)核酸擴(kuò)增過(guò)程，實(shí)現(xiàn)定性及定量檢測(cè)。
儲(chǔ)存條件及有效期
儲(chǔ)存溫度：-20℃±5℃，避光保存；
運(yùn)輸條件：冰袋（2~8℃）；
反復(fù)凍融次數(shù)：≤7次；
有效期：12個(gè)月。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀，包括：
ABI 系列（如7500、StepOnePlus）
MX3000P/3005P
LightCycler（Roche）
Bio-Rad（CFX系列）
Eppendorf（Mastercycler ep realplex）
自備耗材與設(shè)備
無(wú)核酸酶的1.5 mL離心管、0.2 mL PCR反應(yīng)管；
濾芯吸頭（10 μL、200 μL、1000 μL）；
離心機(jī)、振蕩混合器、移液器。
樣品要求
樣本類(lèi)型：胃液分泌物、嘔吐物或培養(yǎng)物（參考《臨床微生物樣本采集規(guī)范》）；
保存條件：
短期：-20℃；
長(zhǎng)期：-70℃（≤6個(gè)月）；
運(yùn)輸：2~8℃冰袋，避免反復(fù)凍融。
操作步驟
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋?zhuān)í?dú)立操作區(qū)）
標(biāo)記6管（7~2號(hào)），每管加45 μL模板稀釋液；
7號(hào)管加5 μL陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8 拷貝/μL），震蕩混勻，得1×10^7 拷貝/μL標(biāo)準(zhǔn)品；
依次10倍稀釋至1×10^2 拷貝/μL。
2. PCR反應(yīng)體系配制（樣本處理區(qū)）
按比例混合試劑引物混合液及模板DNA；
分裝至反應(yīng)管，避免氣泡。
3. 上機(jī)檢測(cè)
設(shè)置擴(kuò)增程序：預(yù)變性（95℃, 2 min）→循環(huán)階段（95℃ 15 s→60℃ 30 s，40循環(huán)）；
采集熒光信號(hào)（FAM通道）。
注意事項(xiàng)
陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)操作，避免污染；
不同批號(hào)試劑不可混用；
實(shí)驗(yàn)分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)）需嚴(yán)格隔離。
質(zhì)量控制
陽(yáng)性對(duì)照：Ct值≤30；
陰性對(duì)照：無(wú)擴(kuò)增曲線(xiàn)；
無(wú)效結(jié)果需復(fù)檢。
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關(guān)鍵字： 旋毛蟲(chóng);染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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