雅氏瓦螨染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 雅氏瓦螨染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Varroa jacobsoni Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR3858 |
產(chǎn)品概述
本試劑盒基于SYBR Green I染料法熒光定量PCR技術(shù),專用于雅氏瓦螨(Varroa jacobsoni)的快速、高靈敏度檢測(cè)。通過針對(duì)雅氏瓦螨保守基因序列(如線粒體16S rRNA或COI基因)設(shè)計(jì)的特異性引物,實(shí)現(xiàn)精準(zhǔn)擴(kuò)增,適用于科研領(lǐng)域?qū)γ鄯浼纳姆肿由飳W(xué)研究。
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用:預(yù)混反應(yīng)體系含所有必要組分(酶、dNTPs、緩沖液等),用戶僅需提供DNA模板。
高特異性:引物經(jīng)嚴(yán)格驗(yàn)證,與狄斯瓦螨等近緣物種無交叉反應(yīng)。
高靈敏度:檢測(cè)下限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)(或1.0×103拷貝/mL)。
防污染設(shè)計(jì):一管式閉管操作,減少氣溶膠污染風(fēng)險(xiǎn)。
兼容性廣:適配主流熒光定量PCR儀(如ABI 7500、Bio-Rad CFX等)。
規(guī)格與組分
| 成分編號(hào) | 組分名稱 | 規(guī)格 | 包裝顏色 |
| 2×qPCR MagicMix(預(yù)混液) | 500 μL/管 | 棕色管 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL | 黃蓋 |
| 雅氏瓦螨PCR引物混合物 | 100 μL | 白蓋 |
| 陽(yáng)性對(duì)照(1×10?拷貝/μL) | 50 μL | 紅蓋 |
| — | 使用手冊(cè) | 1份 | — |
操作流程
1. 樣本制備
樣本類型:蜜蜂體表洗脫液、組織勻漿液或蜂巢碎片。
DNA提?。和扑]使用商品化核酸提取試劑盒,或按說明書進(jìn)行熱裂解釋放DNA。
2. 反應(yīng)體系配置(20 μL體系)
| 組分 | 體積 |
| 2×qPCR MagicMix | 10 μL |
| 引物混合物 | 0.5 μL |
| DNA模板 | 5 μL |
| 無菌水(補(bǔ)足體積) | 4.5 μL |
注意:預(yù)混液需渦旋混勻后瞬時(shí)離心,加樣建議在冰上操作。
3. 擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 10 min | 1 |
| 擴(kuò)增 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| | 60℃ | 1 min | |
| 熒光信號(hào)采集 | 60℃ | 10 sec | |
儀器設(shè)置:選擇SYBR Green通道,無需ROX校正。
4. 結(jié)果分析
陽(yáng)性判定:Ct值≤35且擴(kuò)增曲線呈典型S型。
陰性對(duì)照:應(yīng)無擴(kuò)增信號(hào)(Ct值≥40或無信號(hào))。
注意事項(xiàng)
適用范圍:僅限科研使用,不可用于臨床診斷。
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融(預(yù)混液分裝后使用)。
質(zhì)量控制:每次實(shí)驗(yàn)需包含陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照。
污染防控:實(shí)驗(yàn)區(qū)域分區(qū)操作,使用無核酸酶耗材。
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