諾氏梭狀芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 諾氏梭狀芽孢桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Clostridium novyi Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號(hào) | PR4007 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：用戶僅需提供DNA模板，試劑盒含預(yù)混反應(yīng)體系。
高特異性：針對(duì)諾氏梭狀芽孢桿菌保守序列設(shè)計(jì)引物，無交叉反應(yīng)。
高靈敏度：檢測(cè)下限達(dá)數(shù)百拷貝/反應(yīng)。
閉管操作：一管式熒光定量PCR，避免氣溶膠污染。
適用范圍：科研用途（不可用于臨床診斷）。
試劑盒組成
| 成分 | 包裝規(guī)格 | 備注 |
| 2×qPCR MagicMix | 500 μL（棕色管） | 含熒光染料、dNTPs、酶等 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL（黃蓋） | 用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋 |
| PCR引物混合物 | 100 μL（白蓋） | 特異性引物及探針 |
| PCR陽(yáng)性對(duì)照（1×10?拷貝/μL） | 50 μL（紅蓋/黃蓋） | 非活體DNA片段 |
| 使用手冊(cè) | 1份 | 含操作流程及注意事項(xiàng) |
自備試劑：DNA模板、10×ROX（依機(jī)型需求）。
操作流程
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（102–10?拷貝/μL梯度制備）
在獨(dú)立潔凈區(qū)操作，使用帶濾芯槍頭避免污染。
取6管，分別加入45 μL稀釋液，依次進(jìn)行10倍梯度稀釋（步驟詳見說明書）。
2. PCR反應(yīng)體系配制
反應(yīng)體系（20 μL）：
2×qPCR MagicMix：10 μL
引物混合物：2 μL
DNA模板：2 μL
ROX（可選）：依儀器要求添加
ddH?O：補(bǔ)至20 μL
3. 擴(kuò)增程序設(shè)置
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集熒光信號(hào)）
4. 數(shù)據(jù)分析
閾值循環(huán)數(shù)（Ct值）≤35判定為陽(yáng)性，需結(jié)合陰性/陽(yáng)性對(duì)照結(jié)果。
注意事項(xiàng)
分區(qū)操作：試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)需物理隔離，避免交叉污染。
防RNA降解：樣本處理全程低溫（0–4℃），使用無核酶耗材。
質(zhì)量控制：每批次實(shí)驗(yàn)需設(shè)置陰/陽(yáng)性對(duì)照。
安全規(guī)范：廢棄物需無害化處理，實(shí)驗(yàn)服及器具分區(qū)專用。
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關(guān)鍵字： 諾氏梭狀芽孢桿菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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