本試劑盒為諾氏梭狀芽孢桿菌專用檢測(cè)試劑，依托PCR擴(kuò)增技術(shù)，靶向識(shí)別諾氏梭菌特異性核酸序列，適配畜禽腸道樣本、污染食材、環(huán)境土壤水體樣本。諾氏梭狀芽孢桿菌是典型條件致病菌，易誘發(fā)畜禽腸道紊亂、中毒性感染，在潮濕養(yǎng)殖環(huán)境中易滋生傳播。本試劑盒檢測(cè)特異性強(qiáng)、結(jié)果穩(wěn)定，可精準(zhǔn)鑒別諾氏梭菌與其他近緣梭菌，操作簡(jiǎn)便、適配批量檢測(cè)，適用于養(yǎng)殖環(huán)境微生物監(jiān)測(cè)、畜禽腸道疫病溯源、食品安全風(fēng)險(xiǎn)排查等場(chǎng)景。
產(chǎn)品名稱 | 諾氏梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014033 |
英文名稱 | Clostridium novyiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
畜禽腸道糞便核酸提取，諾氏梭菌核糖體特異性引物 PCR，電泳目標(biāo)片段鑒定菌種。
SYBR 熒光定量 PCR，依靠熔解曲線區(qū)分諾氏梭菌與梭菌屬其他近緣菌株。
一步式芽孢裂解 PCR，樣本與裂解液混合后直接擴(kuò)增，省去單獨(dú)核酸提取步驟。
?操作步驟?：
1. 樣本處理
提取待測(cè)樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。
2. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（示例：6個(gè)梯度）
標(biāo)記離心管（7至2號(hào)），每管加入45μL模板稀釋液。
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照，避免交叉污染。
3. PCR反應(yīng)體系配制（20μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| RT-PCR反應(yīng)液 | 10 |
| 熒光染料 | 0.5 |
| 引物混合液 | 2 |
| RNA模板 | 2 |
| RNase-free水 | 補(bǔ)至20 |
4. 上機(jī)程序
逆轉(zhuǎn)錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調(diào)整）。
預(yù)變性：95℃ 2分鐘。
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)），共40循環(huán)。
?注意事項(xiàng)?：
避免反復(fù)凍融試劑，解凍后需充分混勻。
實(shí)驗(yàn)環(huán)境需嚴(yán)格分區(qū)（試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），防止污染。
陽(yáng)性對(duì)照需與樣本分裝操作。
本產(chǎn)品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。
樣本采集需遵循無(wú)菌原則，運(yùn)輸時(shí)使用干冰或冰袋保存。
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