本試劑盒專為索氏梭狀芽孢桿菌核酸檢測(cè)研發(fā)，采用PCR擴(kuò)增技術(shù)，靶向檢測(cè)該菌種特征性基因片段，適配養(yǎng)殖環(huán)境樣本、畜禽糞便、腸道組織樣本。索氏梭狀芽孢桿菌多存在于潮濕污濁的養(yǎng)殖環(huán)境，易引發(fā)畜禽慢性腸道感染、生長(zhǎng)發(fā)育遲緩，隱性感染會(huì)持續(xù)影響?zhàn)B殖效益。本試劑盒檢測(cè)精準(zhǔn)、特異性強(qiáng)，可有效規(guī)避雜菌干擾，快速完成樣本篩查與病原確診，適用于規(guī)模化養(yǎng)殖場(chǎng)日常疫病監(jiān)測(cè)、環(huán)境菌群管控、畜禽慢性腸道病病因排查等工作。
產(chǎn)品名稱 | 索氏梭狀芽孢桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014037 |
英文名稱 | Clostridium sordelliiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
畜禽腹瀉糞便細(xì)菌 DNA 提取，索氏梭菌 16S rRNA 特異性引物普通 PCR，電泳鑒定菌種。
熒光探針定量 PCR，僅與索氏梭菌靶序列結(jié)合發(fā)光，區(qū)分腸道其他梭狀芽孢桿菌。
恒溫 LAMP 輔助 PCR，試劑盒引物恒溫?cái)U(kuò)增梭菌核酸，搭配顯色體系快速肉眼判讀。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 索氏梭狀芽孢桿菌;PCR檢測(cè)試劑盒;
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