本試劑盒依托實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)，特異性檢測氣腫疽梭狀芽孢桿菌核酸，適配患病畜禽肌肉組織、分泌物、環(huán)境土壤樣本。氣腫疽梭狀芽孢桿菌是畜禽烈性致病菌，可引發(fā)動(dòng)物氣腫疽病，發(fā)病急、死亡率高，傳染性強(qiáng)。本試劑盒可實(shí)現(xiàn)疫病早期快速診斷，精準(zhǔn)區(qū)分氣腫疽梭菌與其他致病梭菌，檢測結(jié)果穩(wěn)定可靠，操作便捷，適用于畜禽臨床疫病確診、養(yǎng)殖區(qū)域疫情監(jiān)測、病死畜禽溯源檢疫等場景。
產(chǎn)品名稱 | 氣腫疽梭狀芽孢桿菌PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014028 |
英文名稱 | Clostridium chauvoeiPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
病死動(dòng)物肌肉組織核酸提取，氣腫疽梭菌毒素基因引物普通 PCR，電泳特異性條帶判定病原。
TaqMan 熒光定量 PCR，探針靶向梭菌特有毒力基因，定量組織內(nèi)致病菌核酸載量。
熱啟動(dòng) PCR 技術(shù)，抑制動(dòng)物組織雜菌 DNA 非特異性擴(kuò)增，降低家畜樣本檢測假陽性。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 氣腫疽梭狀芽孢桿菌;PCR檢測試劑盒;
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