檢測(cè)原理
基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，特異性擴(kuò)增腸粘附性大腸桿菌保守基因序列，結(jié)合熒光信號(hào)實(shí)時(shí)定量分析。
產(chǎn)品用途：科研檢測(cè)（不適用于臨床診斷）
產(chǎn)品名稱(chēng) | 腸粘附性大腸桿菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Enteroadherent E. coli (EAEC) Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類(lèi)型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR3904 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用：用戶僅需提供待測(cè)DNA模板。
高靈敏度：檢測(cè)下限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)。
高特異性：引物針對(duì)腸粘附性大腸桿菌保守序列設(shè)計(jì)，與其他病原體無(wú)交叉反應(yīng)。
一管式檢測(cè)：閉管操作減少污染風(fēng)險(xiǎn)。
寬線性范圍：定量檢測(cè)覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)（10^2–10^7拷貝/μL）。
規(guī)格與組分
| 成分 | 規(guī)格/包裝量 | 保存條件 |
| 2×qPCR預(yù)混液 | 500 μL（含熒光染料） | -20℃避光 |
| 熒光PCR模板稀釋液 | 1 mL | -20℃ |
| 腸粘附性大腸桿菌引物混合物 | 100 μL（干粉或溶液） | -20℃干燥保存 |
| 陽(yáng)性對(duì)照（10^8拷貝/μL） | 50 μL | -20℃單獨(dú)存放 |
| 使用手冊(cè) | 1份 | 常溫 |
運(yùn)輸與保存
運(yùn)輸條件：低溫干冰運(yùn)輸。
保存期限：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
自備試劑與儀器
儀器：支持染料法的熒光定量PCR儀（需根據(jù)機(jī)型自備ROX校正液）。
耗材：無(wú)核酸酶離心管、帶濾芯槍頭、冰盒。
操作步驟
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋?zhuān)ㄊ纠?0^2–10^7拷貝/μL梯度）
標(biāo)記6管，依次加入45 μL稀釋液，梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（每步換槍頭）。
稀釋后立即冰上保存，避免反復(fù)凍融。
2. PCR反應(yīng)體系（20 μL/反應(yīng)）
| 組分 | 體積（μL） |
| 2×qPCR預(yù)混液 | 10 |
| 引物混合物 | 2 |
| DNA模板/對(duì)照 | 2 |
| 無(wú)核酸酶水 | 補(bǔ)足至20 |
3. 擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 3分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40循環(huán)，采集熒光信號(hào)）。
注意事項(xiàng)
陽(yáng)性對(duì)照需在獨(dú)立區(qū)域操作，避免污染。
建議重復(fù)3次實(shí)驗(yàn)以確保數(shù)據(jù)可靠性。
廢棄組分需按生物危害品處理。
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關(guān)鍵字： 腸粘附性大腸桿菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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