細胞簡介：
人食管平滑肌分離自食管組織；食管可分為頸段、胸段和腹段，脊椎動物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內，胸段通過膈孔與腹腔內腹相連，腹段很短與胃相連。哺乳動物的食管結構上由內向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，肌層上1/3段為骨骼肌，下1/3為平滑肌，中段為骨骼肌和平滑肌混合組成。其中，肌纖維的排列方式分為內環(huán)形和外縱形兩層。食管的蠕動是由食管平滑肌收縮嚴格控制，食管還有括約肌，位于環(huán)狀軟骨水平的，稱為食管上括約??；位于食管下端，一部分在膈上，穿過膈孔，另一部分在膈下的高壓帶，稱為食管下括約肌。食管平滑肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態(tài)大小不一，呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
產品名稱 | 人食管平滑肌細胞 | 組織來源 | 食管組織 |
英文名稱 | Human Esophageal Smooth Muscle Cells | 產品規(guī)格 | 5×10^5Cells/T25 |
貨號 | XG-X4491 | 生長特性 | 貼壁 |
產品信息:
產品名稱 人食管平滑肌細胞
組織來源 食管組織
默認種屬 人
產品規(guī)格 5×10^5Cells/T25
方法簡介 公司實驗室分離的人食管平滑肌采用-膠原酶聯(lián)合消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測 公司實驗室分離的人食管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內狀態(tài)佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
人食管平滑肌細胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞培養(yǎng)步驟：
1. 細胞復蘇
運輸與接收：細胞以液氮凍存形式運輸，收到后立即用75%酒精噴灑消毒細胞瓶，置于超凈臺內無菌操作。
復蘇操作：將細胞瓶放入37℃、5% CO培養(yǎng)箱中靜置3-4小時穩(wěn)定狀態(tài)，顯微鏡下觀察細胞形態(tài)和密度，記錄初始狀態(tài)（建議40x、100x、200x各拍一張照片）。
2. 細胞傳代
傳代時機：當細胞密度達80%匯合度時進行傳代。
操作步驟：
棄去舊培養(yǎng)基，用無鈣鎂PBS潤洗細胞1-2次。
加入0.25%胰蛋白酶消化液（1-2 mL），37℃孵育1-2分鐘，顯微鏡下觀察細胞變圓脫落。
加入5 mL完全培養(yǎng)基終止消化，輕輕吹打使細胞完全脫落。
離心（1000 RPM，5分鐘），棄上清，用1-2 mL培養(yǎng)基重懸。
按1:2比例分瓶傳代（如T25瓶分至兩個T25瓶），補充新鮮培養(yǎng)基至5 mL。
換液頻率：每2-3天換液一次。
3. 細胞凍存
凍存液：使用無血清凍存液。
凍存步驟：細胞傳代后，用胰蛋白酶消化并離心，重懸于凍存液，緩慢降溫至-80℃，最終轉入液氮長期保存。
公司正在出售的產品：
兔胰島β細胞 Rabbit Pancreatic Islet 尾 Cells | AF680標記的磷酸化細胞核因子抗體 |
K7M2WT(K7M2-WT)-LUC小鼠骨肉瘤成骨細胞熒光素酶標記 | 組織脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試劑盒 |
土壤α活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測試劑盒 | 酵母氫ATP酶（H＋－ATPase）活性比色法定量檢測試劑盒 |
冰凍切片組織CREB蛋白表達熒光顯微鏡檢測試劑盒 | P27蛋白免疫共沉淀分析試劑盒 |
N－苯甲酰－L－酪乙脂（BTEE） | β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體 |
組織HSV2（HERPES SIMPLX2）病毒定性檢測試劑盒 | IQCJ抗體 |
基質金屬蛋白酶-16抗體 | FITC標記人CD106單克隆抗體 |
鈣依賴膜結合蛋白Copine蛋白8抗體 | 巖藻黃質Fucoxanthin |
轉錄調節(jié)蛋白BACH1.3抗體 | 灰氈毛忍冬素G159934-13-1 |
微管蛋白β1 tubulin(內參)單克隆抗體 | 三磷酸腺苷ATP |
賴脯胰島素抗體 | 人食管平滑肌細胞野菊花內酯62687-22-3 |
組織SGK1激酶活性定量檢測試劑盒（A/B/C） | 小鼠肺小動脈平滑肌細胞 Mouse Pulmonary Arteriolar Smooth Muscle Cells |
蛋白樣品賴層析法去內毒素試劑盒 | JHH-2細胞 |
產品注意事項：
無菌操作是生命線：所有操作必須在生物安全柜內嚴格無菌進行，使用專用試劑和耗材，防止交叉污染。
消化是關鍵步驟：
控制時間：使用胰蛋白酶或TrypLE Express消化時，嚴格控制在1-2分鐘內。顯微鏡下觀察到細胞變圓、邊緣松動即可終止，避免過度消化導致細胞損傷。
消化液選擇：部分供應商推薦使用0.25%胰蛋白酶，也有使用TrypLE Express或0.25% EDTA胰酶的，可根據實驗室條件和細胞反應選擇。
培養(yǎng)基與生長因子：
基礎培養(yǎng)基：推薦使用專用培養(yǎng)基（如EGM-2 MV BulletKit）。若使用DMEM/F12等基礎培養(yǎng)基，需補充10-20%胎牛血清（FBS）及抗生素（如青霉素/鏈霉素）。
生長因子：為促進生長，可添加VEGF、FGF等內皮細胞生長因子。傳代后可嘗試對比培養(yǎng)（一瓶用原裝完全培養(yǎng)基，一瓶用自配培養(yǎng)基）。
細胞密度與傳代：
最佳傳代密度：建議在細胞匯合度達70%-80%時進行傳代，避免過度生長導致細胞狀態(tài)下降。
生長不均處理：若細胞生長不均，成島狀分布，可將細胞消化后重新打散，加入新鮮培養(yǎng)基培養(yǎng)]^。
污染監(jiān)測與處理：
定期檢查：定期觀察細胞有無支原體、細菌等污染跡象。
污染處理：若發(fā)現污染，需根據污染程度決定。輕度污染可嘗試用含高濃度抗生素的培養(yǎng)液反復清洗，但嚴重污染時建議棄置細胞。
關鍵字： 人食管;平滑肌細胞;
上海西格生物有限公司于2019年6月18日成立。
西格生物專注于實驗室和公共衛(wèi)生領域，利用互聯(lián)網、數據分析及自動化技術，包括實驗室固定資產、儀器設備、生物樣本、化學品、試劑、配件耗材、環(huán)境、儀器自動化和高通量篩選等一體化綜合管理平臺。不斷為各行業(yè)實驗室細胞生命學產品、技術服務、免疫學和分子學產品，截止至2024年5月，西格生物已為生命科學、檢驗檢測、化工材料、科研院所、政府機構多行業(yè)300余家知名客戶提供實驗室完整解決方案。本著幫助用戶實現“讓科研場所更智能、讓科研人員更專注、讓科學服務更高效“的愿景，西格生物將繼續(xù)在實驗室科研產品領域持續(xù)發(fā)力，更加重視本土化，建構通用性高、適應性好、模塊搭配靈活，能快速響應客戶需求的產品。