預(yù)期用途
用于科研領(lǐng)域，檢測樣品中油菜源性成分的核酸，支持定性和定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 油菜源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Rapeseed-derived Component Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4828 |
核心特點
即開即用：用戶僅需提供核酸模板，預(yù)混優(yōu)化引物、探針及反應(yīng)體系。
高靈敏度與特異性：針對油菜源性成分保守序列設(shè)計探針，避免交叉反應(yīng)。
雙重檢測功能：
定性檢測：通過Ct值判定陽性/陰性（Ct≤36為陽性，≥40為陰性）。
定量檢測：標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋5個數(shù)量級（10^1–10^6拷貝/μL），線性關(guān)系可靠。
內(nèi)置對照：含無傳染性DNA片段作為陽性對照，區(qū)分假陰性。
操作流程
標(biāo)準(zhǔn)曲線制備（定量檢測需用）
標(biāo)記6管，依次加入45μL稀釋液，從陽性對照（10^7拷貝/μL）起始梯度稀釋（10倍遞減），獲得10^6–10^1拷貝/μL系列濃度。
獨立操作區(qū)完成，使用帶濾芯槍頭避免污染。
樣本核酸提取
推薦配套RNA提取試劑（如柱式病毒RNAout），或兼容其他商業(yè)試劑盒。
設(shè)置陰性對照（水）和陽性對照（試劑盒提供）。
熒光定量PCR反應(yīng)
體系配置（20μL/反應(yīng)）：
模板DNA 5μL
預(yù)混PCR Master Mix 10μL
引物/探針混合液 5μL
擴增程序：
95℃ 5min（預(yù)變性）
95℃ 15s → 60℃ 1min（40循環(huán)，熒光采集）
結(jié)果判讀
定量分析：以標(biāo)準(zhǔn)曲線log值為橫軸、Ct值為縱軸，計算樣本拷貝數(shù)。
定性分析：
陰性對照Ct≥40，陽性對照Ct≤36且擴增曲線正常。
樣本Ct≤36判為陽性；≥40為陰性；36–40需復(fù)測。
注意事項
分區(qū)操作：樣本處理、試劑配制、擴增需在不同區(qū)域進行，防止污染。
試劑處理：使用前充分離心混勻，避光保存；避免反復(fù)凍融（≤3次）。
實驗安全：
穿戴一次性防護用具，實驗后以10%次氯酸或75%酒精消毒臺面。
運輸與儲存：
低溫運輸（泡沫箱加冰），-20℃保存；陽性對照單獨存放。
公司正在出售的產(chǎn)品
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關(guān)鍵字： 油菜源性成分;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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