近平滑念珠菌探針法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱
英文名稱
Candida parapsilosis Probe-based Fluorescent Quantitative PCR Kit
規(guī)格
50T
貨號
PR4810
預期用途
用于檢測近平滑念珠菌核酸,輔助臨床或科研中感染診斷。檢測結果需結合其他指標綜合分析,不可直接用于臨床診斷或治療。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀(如ABI系列、Bio-Rad CFX、Roche LightCycler、Eppendorf等)。
檢驗原理
采用TaqMan探針法實時熒光PCR技術,針對近平滑念珠菌基因保守區(qū)域設計特異性引物及探針。擴增過程中釋放熒光信號,通過儀器實時監(jiān)測熒光強度,實現(xiàn)核酸的定性和定量分析。
試劑組成
| 組分名稱 | 規(guī)格/數(shù)量 |
| 熒光定量PCR反應液 | 500μL/管 |
| 酶混合液 | 50μL/管 |
| 引物-探針干粉 | 50T |
| 陽性對照(10^7拷貝/μL) | 50μL/管 |
| 陰性對照 | 50μL/管 |
| 說明書 | 1份 |
注意事項:
不同批號組分不可混用;
避免反復凍融(≤7次);
保存于-20℃±5℃,有效期12個月。
樣本要求
樣本類型:全血、血清、拭子、組織等。
采集與保存:
短期:-20℃;長期:-70℃(≤6個月);
運輸需使用2~8℃冰袋,禁止反復凍融。
核酸提?。航ㄗh采用商業(yè)化DNA提取試劑盒。
操作步驟
標準曲線制備(定量檢測需6個梯度稀釋,10^1~10^6拷貝/μL)。
加樣:
反應體系20μL(含模板DNA 5μL)。
PCR擴增程序:
預變性:95℃ 10min;
40循環(huán):95℃ 15s → 60℃ 60s(采集FAM通道信號)。
結果判讀
定量分析:通過標準曲線計算樣本拷貝數(shù)。
定性分析:
Ct≤39:陽性;
Ct≥40:陰性;
39<Ct<40:需復測。
局限性及注意事項
局限性:
基因突變可能導致假陰性;
交叉污染可能導致假陽性。
實驗要求:
分區(qū)操作(試劑配制、加樣、擴增);
使用無酶耗材,避免氣溶膠污染。
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