鮰愛德華氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒
商品屬性
產(chǎn)品名稱 | 鮰愛德華氏菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Edwardsiella ictaluri Dye-based qPCR Kit |
規(guī)格 | 50T | 貨號 | PR4534 |
檢驗原理
本試劑盒基于SYBR Green I熒光染料法,通過設(shè)計特異性引物靶向鮰愛德華氏菌基因保守區(qū)域,在實時熒光定量PCR儀中檢測核酸擴增信號。擴增過程中釋放的熒光強度與模板量成正比,實現(xiàn)定性和定量分析。
試劑組成
鮰愛德華氏菌擴增液:50μL ×1管
鮰愛德華氏菌反應(yīng)液:950μL ×1管
陽性質(zhì)控品(含靶基因片段):50μL ×1管
陰性質(zhì)控品(無核酸模板):50μL ×1管
說明書:1份
注意事項:
不同批號組分不可混用。
試劑盒內(nèi)組分可滿足標稱檢測次數(shù)。
儲存條件及有效期
儲存:-20℃±5℃避光保存,避免反復(fù)凍融(≤7次)。
有效期:12個月。
適用儀器
兼容主流熒光定量PCR儀,包括:
ABI系列(如7500、StepOnePlus)
Roche LightCycler
Bio-Rad CFX系列
Eppendorf Mastercycler ep realplex
需自備耗材:
無核酸酶的離心管(1.5mL、0.2mL PCR管)、濾芯吸頭(10μL/200μL/1000μL)、離心機、移液器等。
樣品要求
樣本類型:胃液分泌物、培養(yǎng)物等(參考《臨床微生物樣本采集規(guī)范》)。
保存條件:
短期:-20℃;
長期:-70℃以下(≤6個月);
運輸:2~8℃冰袋,避免反復(fù)凍融。
使用方法
樣本處理(樣本處理區(qū)):
按規(guī)范提取DNA,避免交叉污染。
PCR反應(yīng)體系配制(試劑準備區(qū)):
按說明書比例混合反應(yīng)液、擴增液及模板DNA。
上機檢測(擴增區(qū)):
設(shè)置程序:預(yù)變性(95℃, 2min)→循環(huán)擴增(95℃ 15s, 60℃ 30s, 40次)。
結(jié)果分析:
根據(jù)擴增曲線和Ct值判定樣本陰陽性。
性能參數(shù)
靈敏度:可檢測低至幾百拷貝/反應(yīng)。
特異性:與相近病原體無交叉反應(yīng)。
注意事項
實驗分區(qū)操作,避免氣溶膠污染。
陰/陽性質(zhì)控品需同步檢測以驗證體系有效性。
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關(guān)鍵字: 鮰愛德華氏菌;染料法熒光定量;RT-PCR試劑盒;
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