檢驗原理
本試劑盒基于SYBR Green染料法實時熒光定量PCR技術(shù)，針對獸疫鏈球菌（B組鏈球菌）基因組高度保守區(qū)域設(shè)計特異性引物。在反應(yīng)體系中，若存在目標(biāo)核酸模板，PCR擴增過程中SYBR Green染料與雙鏈DNA結(jié)合釋放熒光信號，通過實時監(jiān)測熒光強度實現(xiàn)定性或定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 獸疫鏈球菌染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Streptococcus zooepidemicus Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4396 |
產(chǎn)品特點
高靈敏度：優(yōu)化引物設(shè)計，檢測限低至10拷貝/μL。
特異性強：引物經(jīng)嚴(yán)格驗證，不與相近菌種（如A組鏈球菌）發(fā)生交叉反應(yīng)。
即開即用：預(yù)混反應(yīng)液含PCR所需酶、dNTPs及緩沖液，僅需加入模板DNA。
質(zhì)量控制：提供陽性對照（非活體DNA片段），便于區(qū)分假陰性結(jié)果。
適用范圍：支持臨床樣本（血液、分泌物）、食品及環(huán)境樣本的檢測。
操作流程
樣本前處理
臨床樣本（如血液、分泌物）：按無菌操作采集，EDTA抗凝處理后提取DNA。
食品/環(huán)境樣本：參照微生物學(xué)標(biāo)準(zhǔn)預(yù)處理，富集后提取核酸。
試劑準(zhǔn)備
解凍預(yù)混液：置于冰上緩慢融化，輕彈混勻后短暫離心（1000 rpm，10秒）。
配制反應(yīng)體系（示例）：
預(yù)混液 10 μL
引物混合液 2 μL
模板DNA 2 μL
RNase-free水 6 μL
PCR擴增
程序設(shè)置（以ABI 7500為例）：
預(yù)變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（熒光采集）
數(shù)據(jù)分析：通過擴增曲線和熔解曲線判定結(jié)果，Ct值≤35為陽性。
注意事項
防污染措施：分區(qū)操作（樣本處理、PCR配制、擴增區(qū)），使用帶濾芯槍頭。
質(zhì)量控制：每批次實驗需包含陰性對照（無模板水）及陽性對照（試劑盒提供）。
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融（有效期12個月）。
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關(guān)鍵字： 獸疫鏈球菌;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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