產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)，專(zhuān)為熱帶利什曼原蟲(chóng)（Leishmania tropica）的檢測(cè)設(shè)計(jì)，適用于科研領(lǐng)域。試劑盒具有高靈敏度和特異性，可進(jìn)行定性和定量分析，檢測(cè)限可達(dá)數(shù)百拷貝/反應(yīng)。
產(chǎn)品名稱(chēng) | 熱帶利什曼原蟲(chóng)染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱(chēng) | Leishmania tropica Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類(lèi) | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類(lèi)型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4406 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用：用戶(hù)僅需提供樣品DNA模板。
高特異性：引物針對(duì)熱帶利什曼原蟲(chóng)保守序列設(shè)計(jì)，避免交叉反應(yīng)。
一管式檢測(cè)：減少操作步驟，降低污染風(fēng)險(xiǎn)。
雙功能應(yīng)用：支持定性和定量檢測(cè)，定量線(xiàn)性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)。
配套齊全：包含陽(yáng)性對(duì)照、陰性對(duì)照及專(zhuān)用稀釋液，確保結(jié)果可靠性。
組分與規(guī)格
2×qPCR MagicMix（棕色管，500 μL）
熒光PCR專(zhuān)用模板稀釋液（黃蓋，1 mL）
熱帶利什曼原蟲(chóng)PCR引物混合物（白蓋，100 μL）
陽(yáng)性對(duì)照（1×10^8 拷貝/μL，紅蓋，50 μL）
陰性對(duì)照（DEPC-H2O）
注：50次反應(yīng)體系（20 μL/次）。
樣本要求
采集與保存：樣本需低溫運(yùn)輸（-20℃），保存期限1年，避免反復(fù)凍融。
DNA提?。和扑]使用兼容性核酸提取試劑盒，確保純度（OD260/280≈1.8-2.0）。
操作步驟
1. 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)制備（定量檢測(cè)適用）
將陽(yáng)性對(duì)照按10倍梯度稀釋?zhuān)?×10^8至1×10^3拷貝/μL），分別標(biāo)記為7至2號(hào)管。
每稀釋步驟更換槍頭，渦旋混勻后冰上保存。
2. 反應(yīng)體系配制
每20 μL反應(yīng)體系包含：
10 μL 2×qPCR MagicMix
2 μL 引物混合物
2 μL 模板DNA（待測(cè)樣品/對(duì)照）
6 μL DEPC-H2O
3. 擴(kuò)增程序
預(yù)變性：95℃ 5分鐘
循環(huán)階段（40 cycles）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）
結(jié)果判讀
定性檢測(cè)：
陽(yáng)性：Ct值≤35，且擴(kuò)增曲線(xiàn)呈典型S型。
陰性：Ct值≥40。
可疑（35<Ct<40）：需重復(fù)檢測(cè)，若Ct仍<40判為陽(yáng)性。
定量檢測(cè)：以標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)log值為橫軸、Ct值為縱軸，計(jì)算待測(cè)樣本濃度。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作（樣本制備區(qū)、試劑配制區(qū)、擴(kuò)增區(qū)），避免污染。
陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)存放，防止交叉污染。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
運(yùn)輸與儲(chǔ)存
運(yùn)輸：泡沫箱加冰密封（-20℃）。
儲(chǔ)存：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
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關(guān)鍵字： 熱帶利什曼原蟲(chóng);染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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