產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術開發(fā)，專用于碩大利什曼原蟲（Leishmania major）的定性和定量檢測。適用于科研用途，具有高靈敏度和特異性，操作便捷，兼容常規(guī)核酸提取方法。
產(chǎn)品名稱 | 碩大利什曼原蟲染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Leishmania major Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4407 |
產(chǎn)品特點
即開即用：僅需提供樣品DNA模板，無需額外優(yōu)化引物或反應體系。
高靈敏度與特異性：引物針對碩大利什曼原蟲保守序列設計，避免與其他病原體交叉反應。
雙重檢測功能：支持定性和定量分析，定量線性范圍達5個數(shù)量級。
內(nèi)置對照：含陽性對照（1×10^8拷貝/μL），便于區(qū)分假陰性結果。
兼容性：適配多數(shù)市售核酸提取試劑盒，標準20μL反應體系，可完成50次檢測。
試劑盒組成
PCR MagicMix 3.0（預混染料法qPCR試劑，含熒光染料）
碩大利什曼原蟲特異性引物混合液
陽性對照（1×10^8拷貝/μL）
陰性對照（DEPC-H2O）
超純水（無核酸酶）
詳細使用手冊
儲存與運輸
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月；陽性對照需單獨存放。
運輸方式：低溫干冰運輸。
實驗步驟
DNA提取
使用自選方法提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，OD260/280為1.7-2.0。
標準曲線制備（定量檢測需選）
將陽性對照梯度稀釋（10^7至10^2拷貝/μL），每稀釋步驟更換槍頭。
若僅定性檢測，稀釋至10^5拷貝/μL即可。
反應體系配制
每20μL反應體系包含：
10 μL PCR MagicMix
2 μL 引物混合液
2 μL 模板DNA（樣本/對照）
6 μL 超純水
qPCR程序
預變性：95℃ 3分鐘
循環(huán)步驟（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號）
結果分析
定量：根據(jù)標準曲線計算拷貝數(shù)。
定性：Ct值≤35且擴增曲線呈S型判為陽性。
注意事項
分區(qū)操作：模板添加與擴增需在不同區(qū)域進行，避免污染。
質量控制：每批次實驗需包含陰/陽性對照。
用途限制：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關鍵字： 碩大利什曼原蟲;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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