產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)開(kāi)發(fā)，專用于檢測(cè)里氏立克次氏體（Rickettsia risticii）的核酸，適用于科研用途（不可用于臨床診斷）。試劑盒包含優(yōu)化的引物、陽(yáng)性對(duì)照及預(yù)混反應(yīng)體系，具有高靈敏度和特異性，可進(jìn)行定性與定量分析。
產(chǎn)品名稱 | 里氏立克次氏體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Rickettsia rickettsii Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4411 |
產(chǎn)品特點(diǎn)
即開(kāi)即用：用戶僅需提供待測(cè)DNA模板。
高靈敏度：檢測(cè)限可達(dá)幾百拷貝/反應(yīng)，線性范圍覆蓋至少5個(gè)數(shù)量級(jí)。
特異性強(qiáng)：引物針對(duì)保守序列設(shè)計(jì)，避免與其他病原體核酸交叉反應(yīng)。
質(zhì)量控制：提供陽(yáng)性對(duì)照（1×10? 拷貝/μL），便于區(qū)分假陰性結(jié)果。
兼容性：支持多數(shù)熒光定量PCR儀，信號(hào)采集建議在復(fù)性或延伸步驟（激發(fā)波長(zhǎng)471 nm，發(fā)射波長(zhǎng)530 nm）。
包裝規(guī)格
| 成分 | 規(guī)格/包裝量 | 備注 |
| PCR MagicMix 3.0 | 1 mL（紅蓋） | 預(yù)混反應(yīng)液 |
| 超純水 | 1 mL（亮黃色） | 稀釋模板用 |
| 引物混合液 | 100 μL（白蓋） | 特異性引物 |
| 陽(yáng)性對(duì)照 | 50 μL（黃蓋） | 1×10? 拷貝/μL |
| 使用手冊(cè) | 1份 | 操作指南 |
操作流程
1. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（102-10? 拷貝/μL梯度制備）
注意事項(xiàng)：操作需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免污染。
步驟：
標(biāo)記6管，分別加入45 μL稀釋液。
取5 μL陽(yáng)性對(duì)照（1×10? 拷貝/μL）加入第1管，震蕩混勻，得10? 拷貝/μL梯度，依次稀釋至102 拷貝/μL。
2. PCR反應(yīng)體系（20 μL體系）
按比例加入預(yù)混液、引物、模板DNA及ROX校正染料（需自備）。
3. 上機(jī)檢測(cè)
程序設(shè)置：95℃預(yù)變性2分鐘；95℃ 15秒→60℃ 60秒（40循環(huán)）。
4. 數(shù)據(jù)分析
定量檢測(cè)：以陽(yáng)性對(duì)照log濃度為橫軸、Ct值為縱軸繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算樣本濃度。
定性檢測(cè)：
陰性：Ct≥40；陽(yáng)性：Ct≤35；
35<Ct<40需復(fù)測(cè)，復(fù)測(cè)Ct<40判為陽(yáng)性。
保存與運(yùn)輸
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個(gè)月。
運(yùn)輸方式：低溫運(yùn)輸。
注意事項(xiàng)
本產(chǎn)品僅限科研使用。
避免反復(fù)凍融，開(kāi)封后盡快使用。
操作時(shí)需穿戴防護(hù)裝備，廢棄物料按生物危害品處理。
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關(guān)鍵字： 里氏立克次氏體;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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