產(chǎn)品概述
本試劑盒基于染料法熒光定量PCR技術(shù)開發(fā)，專用于檢測普氏立克次氏體（Rickettsia prowazekii）的核酸，適用于科研領(lǐng)域。試劑盒通過優(yōu)化引物設(shè)計，確保高靈敏度和特異性，可檢測低至1000拷貝/反應(yīng)的靶序列，且與其他病原體無交叉反應(yīng)。
產(chǎn)品名稱 | 普氏立克次氏體染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Rickettsia prowazekii Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測類型 | PCR檢測 | 產(chǎn)品貨號 | PR4414 |
產(chǎn)品特點
即開即用：用戶僅需提供待測DNA模板，無需額外配制主反應(yīng)混合液。
高靈敏度與特異性：引物針對普氏立克次氏體保守序列設(shè)計，靈敏度達1000拷貝/反應(yīng)。
一管式檢測：采用預(yù)混液形式，減少操作步驟及污染風(fēng)險。
多用途分析：支持定性與定量檢測，定量線性范圍覆蓋5個數(shù)量級（10^2–10^7拷貝/μL）。
配套對照：提供無傳染性的DNA片段作為陽性對照，便于結(jié)果判讀。
規(guī)格與成分
| 成分 | 包裝規(guī)格 | 備注 |
| 2×qPCR MasterMix | 500 μL（棕色管）| 含SYBR Green熒光染料 |
| 熒光PCR專用模板稀釋液 | 1 mL（黃蓋管） | 用于標(biāo)準(zhǔn)品稀釋 |
| 普氏立克次氏體引物混合物 | 100 μL（白蓋管）| 預(yù)混特異性引物 |
| 陽性對照（1×10^8拷貝/μL）| 50 μL（紅蓋管）| 用于標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 |
| 使用手冊 | 1份 | 含詳細操作流程 |
運輸與保存
運輸條件：低溫運輸（冰袋或干冰）。
保存條件：-20℃避光保存，有效期12個月。
自備試劑與儀器
自備試劑：待測DNA模板、10×ROX校正染料（需根據(jù)PCR儀器型號選擇是否添加）。
儀器要求：熒光定量PCR儀（支持SYBR Green檢測通道）。
使用方法
1. 陽性對照稀釋（標(biāo)準(zhǔn)曲線制備）
標(biāo)記6管稀釋液（編號6至1），每管加入45 μL模板稀釋液。
依次梯度稀釋陽性對照（從10^7至10^2拷貝/μL），每步更換槍頭，渦旋混勻后冰上暫存。
2. PCR反應(yīng)體系配制
按20 μL體系配制：10 μL 2×MasterMix、2 μL引物混合物、2 μL模板DNA、6 μL無核酸酶水。
若儀器需ROX校正，額外加入0.4 μL 10×ROX。
3. 反應(yīng)程序設(shè)置
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
擴增循環(huán)（40次）：95℃ 15秒 → 60℃ 1分鐘（采集熒光信號）；
熔解曲線分析：60–95℃（可選，用于特異性驗證）。
注意事項
分區(qū)操作：陽性對照稀釋需在獨立區(qū)域完成，避免污染。
質(zhì)量控制：建議每次實驗均包含陰性對照（無模板對照）及標(biāo)準(zhǔn)曲線。
適用范圍：僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 普氏立克次氏體;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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