產(chǎn)品特點(diǎn)
即開即用：預(yù)混優(yōu)化試劑，用戶僅需提供DNA模板。
高特異性：引物針對(duì)Rickettsia typhi保守序列設(shè)計(jì)，無交叉反應(yīng)。
靈敏度高：檢測(cè)下限可達(dá)102拷貝/μL，線性范圍覆蓋5個(gè)數(shù)量級(jí)（102~10?拷貝/μL）。
內(nèi)置對(duì)照：含陽(yáng)性對(duì)照（非活體DNA片段，10?拷貝/μL）及上樣染料，便于結(jié)果判讀。
雙重應(yīng)用：支持定性與定量檢測(cè)，兼容常規(guī)PCR儀及熒光定量PCR儀。
產(chǎn)品名稱 | 莫氏立克次體（現(xiàn)名傷寒立克次體）染料法熒光定量PCR試劑盒 | 英文名稱 | Rickettsia typhi Dye-based qPCR Kit |
產(chǎn)品規(guī)格 | 50T | 產(chǎn)品分類 | 熒光定量PCR |
檢測(cè)類型 | PCR檢測(cè) | 產(chǎn)品貨號(hào) | PR4415 |
試劑盒組分
| 成分 | 包裝規(guī)格 | 說明 |
| PCR預(yù)混液（含染料） | 1 mL | 含dNTPs、Taq酶、Mg2?等 |
| 陽(yáng)性對(duì)照DNA | 50 μL（10?拷貝/μL） | 需獨(dú)立存放，避免污染 |
| 核酸釋放劑（選配） | 1 mL | 用于樣本前處理 |
| 超純水 | 1 mL | 稀釋模板用 |
| 使用說明書 | 1份 | 含操作流程及數(shù)據(jù)分析方法 |
實(shí)驗(yàn)步驟
1. 樣本制備
提取待測(cè)樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL。
2. 陽(yáng)性對(duì)照稀釋（梯度制備）
按10倍梯度稀釋陽(yáng)性對(duì)照（10?拷貝/μL）至102~10?拷貝/μL，用于標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制。
3. PCR反應(yīng)體系
每20μL反應(yīng)體系：
預(yù)混液10 μL
引物混合液2 μL
模板DNA 2 μL
超純水補(bǔ)至20 μL
4. 擴(kuò)增程序
| 步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 5 min | 1 |
| 變性 | 95℃ | 15 sec | 40 |
| 退火/延伸 | 60℃ | 30 sec | |
| 熒光采集 | 60℃ | 30 sec | |
5. 數(shù)據(jù)分析
通過Ct值與標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本拷貝數(shù)，閾值設(shè)定為擴(kuò)增曲線指數(shù)增長(zhǎng)初期。
注意事項(xiàng)
實(shí)驗(yàn)分區(qū)操作，避免氣溶膠污染。
陽(yáng)性對(duì)照需單獨(dú)存放，使用后徹底清潔工作臺(tái)。
試劑解凍后需渦旋混勻，避免反復(fù)凍融（≤3次）。
本產(chǎn)品僅限科研使用，不可用于臨床診斷。
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關(guān)鍵字： 莫氏立克次體（現(xiàn)名傷寒立克次體）;染料法熒光定量;PCR試劑盒;
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