本試劑盒專為牛布魯氏桿菌核酸檢測研發(fā)，通過特異性PCR擴(kuò)增體系，靶向牛源布魯氏桿菌保守基因，可檢測牛血液、乳汁、子宮分泌物、病變組織樣本中的病原菌。牛布魯氏桿菌易導(dǎo)致母牛流產(chǎn)、公牛睪丸炎，試劑盒靈敏度高，可檢出低載量隱性感染樣本，操作簡便、結(jié)果精準(zhǔn)。主要用于牛場布魯氏桿菌常態(tài)化篩查、引種檢疫、患病牛只確診及人畜共患病防控。
產(chǎn)品名稱 | 牛布魯氏桿菌PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P013954 |
英文名稱 | Brucella bovisPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
引物靶向牛種布魯氏菌 bp26 特異性基因，熒光定量 PCR 檢測牛血液、乳汁樣本內(nèi)致病菌核酸。
常規(guī) PCR 擴(kuò)增牛布魯氏菌特異性插入序列，瓊脂糖電泳條帶陽性判定牛布魯氏菌感染。
乳汁樣本脫脂處理后磁珠富集細(xì)菌 DNA，qPCR 低拷貝菌也可穩(wěn)定檢出。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時采集熒光信號，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長；
陰性：無Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會直接導(dǎo)致無擴(kuò)增條帶
陽性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測場景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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關(guān)鍵字： 牛布魯氏桿菌;PCR檢測試劑盒;
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