本試劑盒針對(duì)豬布魯氏桿菌特異性基因研發(fā)PCR擴(kuò)增體系,可精準(zhǔn)檢測(cè)豬血液、精液、子宮分泌物、豬胎兒組織樣本中的病原菌核酸。豬布魯氏桿菌主要造成母豬流產(chǎn)、公豬生殖障礙,嚴(yán)重影響生豬繁育產(chǎn)能,試劑盒靈敏度高、特異性強(qiáng),可規(guī)避豬體內(nèi)其他菌群干擾。適用于規(guī)?;i場(chǎng)繁育種群篩查、感染病例確診、引種檢疫及生豬布魯氏菌病專項(xiàng)防控。
產(chǎn)品名稱 | 豬布魯氏桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P013961 |
英文名稱 | Brucella suisPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理:

熒光 qPCR 靶向豬布魯氏菌特異性毒力操縱子基因,檢測(cè)豬淋巴結(jié)、精液致病菌核酸。
普通 PCR 擴(kuò)增豬布魯氏菌特有 IS711 插入片段,電泳區(qū)分其他家畜布魯氏菌。
精液樣本去雜質(zhì)直擴(kuò) PCR,簡(jiǎn)化前處理流程,豬場(chǎng)批量篩查適用。
?操作步驟?:

樣本處理(樣本處理區(qū))
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸,避免交叉污染。
試劑配制(試劑準(zhǔn)備區(qū))
反應(yīng)體系(20μL/管):19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液,分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增(核酸擴(kuò)增區(qū))
循環(huán)參數(shù):
預(yù)變性:95℃ 2min(1循環(huán));
擴(kuò)增:95℃ 15sec → 60℃ 30sec(45循環(huán),60℃時(shí)采集熒光信號(hào),F(xiàn)AM通道)。
結(jié)果分析
陽(yáng)性:Ct值≤40,擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng);
陰性:無(wú)Ct值或曲線平直;
可疑:40<Ct≤45,需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求:陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32,陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?:

所有試劑避免反復(fù)凍融,可分裝小體積凍存;融化后冰上放置不超過(guò) 2 h,酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)??截悢?shù)極高,開蓋全程在生物安全柜操作,防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶,槍頭一次性使用;實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過(guò)期禁止使用
僅限科研檢測(cè),嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸,減少抑制劑干擾
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