本試劑盒依托特異性PCR擴增體系，靶向肉芽腫鞘桿菌專屬核酸序列，可精準檢測畜禽病變組織、皮膚病灶、分泌物樣本中的病原菌。該病菌主要引發(fā)動物肉芽腫性炎癥，病程隱蔽、易誤診，試劑盒可實現(xiàn)分子水平精準確診，靈敏度高，可檢出微量病原菌核酸。適用于畜禽疑難炎癥病例溯源、臨床確診、養(yǎng)殖疫病監(jiān)測及細菌致病性相關科研檢測。

基礎原理：

病灶組織細菌 DNA qPCR，靶向肉芽腫鞘桿菌特異性質?；颍瑹晒馓结槍Ｒ粰z出該人畜共患病菌。

普通 PCR 擴增細菌特有 16S rRNA 基因，電泳區(qū)分皮膚病灶其他致病菌。

生殖道拭子磁珠提純細菌核酸后擴增，微量感染樣本精準檢出。

?操作步驟?：

1. 樣本處理

提取待測樣本RNA，建議使用商品化RNA提取試劑盒。

2. 陽性對照稀釋（示例：6個梯度）

標記離心管（7至2號），每管加入45μL模板稀釋液。

按10倍梯度稀釋陽性對照，避免交叉污染。

3. PCR反應體系配制（20μL/反應）

| 組分 | 體積（μL） |

| RT-PCR反應液 | 10 |

| 熒光染料 | 0.5 |

| 引物混合液 | 2 |

| RNA模板 | 2 |

| RNase-free水 | 補至20 |

4. 上機程序

逆轉錄：50℃ 15分鐘（可選，根據(jù)病毒RNA特性調整）。

預變性：95℃ 2分鐘。

循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號），共40循環(huán)。

?注意事項?：

避免反復凍融試劑，解凍后需充分混勻。

實驗環(huán)境需嚴格分區(qū)（試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、擴增區(qū)），防止污染。

陽性對照需與樣本分裝操作。

本產品僅限科研用途，不可用于臨床診斷。

操作時需穿戴防護裝備，避免試劑接觸皮膚或眼睛。

樣本采集需遵循無菌原則，運輸時使用干冰或冰袋保存。

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