本試劑盒專為牛肺線蟲核酸檢測(cè)設(shè)計(jì)，依托特異性PCR擴(kuò)增原理，靶向牛肺線蟲特征基因，可精準(zhǔn)檢測(cè)牛體肺部組織、痰液、糞便樣本中的病原核酸。試劑盒檢測(cè)快速、結(jié)果可靠，能夠早期發(fā)現(xiàn)牛肺線蟲隱性感染，助力牛呼吸系統(tǒng)寄生蟲病的預(yù)防與精準(zhǔn)治療。
產(chǎn)品名稱 | 牛肺線蟲PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014099 |
英文名稱 | Dictyocaulus viviparusPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
牛源肺線蟲特異性 ITS2 序列，牛糞便、支氣管沖洗液 DNA 特異性 PCR。
線粒體 Cytb 熒光定量探針，微量牛糞便蟲卵快速檢出病原。
牛呼吸道樣本裂解蟲體提取核酸，蟲種引物擴(kuò)增判定牛肺線蟲寄生。
?操作步驟?：
樣本制備：
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL，A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制（20 μL體系示例）：
預(yù)混PCR Master Mix（含染料、dNTPs、Taq酶等）
特異性引物混合液
模板DNA（2~5 μL）
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序：
預(yù)變性：95℃ 5分鐘；
循環(huán)階段（40~45 cycles）：95℃ 10秒 → 60℃ 30秒（采集熒光信號(hào)）；
熔解曲線分析：60~95℃（可選，用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性）。
結(jié)果判讀：
陽性：Ct值≤35且熔解曲線峰單一；
陰性：Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線；
可疑：35<Ct值<40，建議復(fù)測(cè)或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?：
所有耗材必須無核酸酶，吸頭一次性使用，禁止重復(fù)吸??；
陽性模板拷貝濃度高，開蓋操作輕柔，避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染；
試劑融化后冰上放置不超過 2 h，用完立即放回 - 20℃；
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄；
試劑盒僅用于動(dòng)植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測(cè)，禁止人體臨床檢測(cè)；
移液器、操作臺(tái)定期紫外消毒，長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字： 牛肺線蟲;PCR檢測(cè)試劑盒;
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