本試劑盒依托大腸桿菌屬通用保守基因擴增技術，可全面檢測樣本中致病性與非致病性大腸桿菌核酸，覆蓋所有大腸桿菌菌株。試劑盒特異性強，不與其他腸道桿菌交叉干擾，適配食品、水體、臨床糞便、畜禽樣本，適用于各類場景下大腸桿菌的全面篩查、菌群檢測和污染風險評估。
產(chǎn)品名稱 | 大腸桿菌通用PCR檢測試劑盒含致病性和非致病性 | 貨號 | YS-P014109 |
英文名稱 | E.coliPCR(） | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎原理：
大腸桿菌屬共有的 uidAβ 葡萄糖醛酸酶基因，食品、糞便細菌 DNA 廣譜篩查全部大腸桿菌。
通用熒光探針靶向 16S rRNA 保守序列，qPCR 區(qū)分大腸桿菌與其他腸桿菌科細菌。
樣本增菌液提取細菌 DNA，屬通用引物擴增標記基因，僅判定大腸桿菌存在，不分致病型。
?操作步驟?：
1. DNA提?。颖局苽鋮^(qū)）
使用自選方法或兼容試劑盒提取樣本DNA，建議濃度≥10 ng/μL，A260/A280比值1.8-2.0。
2. 標準曲線制備（獨立操作區(qū)）
標記6管為梯度稀釋點（如7-2），每管加45 μL DEPC水。
取5 μL陽性對照依次稀釋，混勻后作為標準品（避免污染）。
3. PCR反應體系配制（試劑配制區(qū)）
按以下比例配制（示例）：
| 組分 | 體積（μL） |
| 2× Master Mix | 10 |
| 引物混合液 | 2 |
| DNA模板 | 2 |
| DEPC水 | 6 |
4. 上機檢測
程序設置：預變性95℃ 3 min；40循環(huán)（95℃ 10 s, 60℃ 30 s）；熔解曲線分析。
數(shù)據(jù)分析：根據(jù)Ct值及標準曲線計算樣本濃度。
?注意事項?：
1、實驗分區(qū)管理?
實驗全程需嚴格劃分三個獨立區(qū)域：?試劑準備區(qū)、樣本處理區(qū)、PCR擴增區(qū)?，各區(qū)實驗服、移液器及耗材?嚴禁混用?，防止交叉污染。
?2、防止污染操作?
使用帶濾芯槍頭，每步更換槍頭；
陽性對照操作應在專用生物安全柜中進行，避免污染其他試劑；
加樣后立即蓋緊管蓋，避免氣溶膠擴散。
?3、試劑保存與使用?
所有試劑需?-20℃避光保存?，避免反復凍融，確保穩(wěn)定性；
使用前于冰上解凍并輕柔混勻，瞬時離心后使用。
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關鍵字： 大腸桿菌通用含致病性和非致病性;PCR檢測試劑盒;
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