本試劑盒針對(duì)?？刹《咎禺愋曰蛐蛄性O(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增體系，可快速檢測(cè)人體咽拭子、糞便、腦脊液樣本中的?？刹《竞怂帷．a(chǎn)品檢測(cè)靈敏度高、特異性好，能夠助力手足口病、病毒性腦膜炎等相關(guān)疾病的病原診斷、臨床分型和疫情監(jiān)測(cè)。
產(chǎn)品名稱 | 埃可病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014113 |
英文名稱 | ECHO VirusRTPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
樣本 RNA 逆轉(zhuǎn)錄，靶向?？刹《?VP1 衣殼基因 RT-PCR 篩查腸道致病病毒。
通用腸道病毒熒光 RT-qPCR 探針，特異性識(shí)別埃可病毒保守核酸序列。
糞便、咽拭子 RNA 純化逆轉(zhuǎn)錄，病毒引物擴(kuò)增特征條帶判定陽(yáng)性。
?操作步驟?：
樣本處理（樣本處理區(qū)）
推薦使用磁珠法或離心柱法提取核酸，避免交叉污染。
試劑配制（試劑準(zhǔn)備區(qū)）
反應(yīng)體系（20μL/管）：19μL反應(yīng)液 + 1μL酶液，分裝后加入5μL待測(cè)核酸或質(zhì)控品。
PCR擴(kuò)增（核酸擴(kuò)增區(qū)）
循環(huán)參數(shù)：
預(yù)變性：95℃ 2min（1循環(huán)）；
擴(kuò)增：95℃ 15sec → 60℃ 30sec（45循環(huán)，60℃時(shí)采集熒光信號(hào)，F(xiàn)AM通道）。
結(jié)果分析
陽(yáng)性：Ct值≤40，擴(kuò)增曲線呈指數(shù)增長(zhǎng)；
陰性：無(wú)Ct值或曲線平直；
可疑：40<Ct≤45，需復(fù)測(cè)確認(rèn)。
質(zhì)控要求：陽(yáng)性質(zhì)控Ct≤32，陰性質(zhì)控?zé)o擴(kuò)增。
?注意事項(xiàng)?：
所有試劑避免反復(fù)凍融，可分裝小體積凍存；融化后冰上放置不超過 2 h，酶失活會(huì)直接導(dǎo)致無(wú)擴(kuò)增條帶
陽(yáng)性質(zhì)?？截悢?shù)極高，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
所有耗材必須無(wú)核酸酶，槍頭一次性使用；實(shí)驗(yàn)后 PCR 管、廢液 121℃高壓滅菌后丟棄
試劑盒出現(xiàn)渾濁、變色、結(jié)冰分層、過期禁止使用
僅限科研檢測(cè)，嚴(yán)禁用于人體臨床疾病診斷、食品出廠檢疫等合規(guī)檢測(cè)場(chǎng)景
土壤、糞便、腐殖質(zhì)樣本優(yōu)先使用磁珠法提取核酸，減少抑制劑干擾
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