本試劑盒針對(duì)查菲埃立克體專屬保守基因設(shè)計(jì)PCR擴(kuò)增體系，可專一性檢測人體、媒介蜱蟲樣本中的查菲埃立克體核酸。產(chǎn)品靈敏度高、特異性優(yōu)異，可早期篩查埃立克體感染，適用于人單核細(xì)胞埃立克體病的臨床診斷、蟲媒疫病監(jiān)測和疫區(qū)防控。
產(chǎn)品名稱 | 查菲埃立克體PCR檢測試劑盒 | 貨號(hào) | YS-P014119 |
英文名稱 | Ehrlichia chaffeensisPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個(gè)月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理：
靶向查菲埃立克體 16S rRNA 特異性區(qū)段，人血液白細(xì)胞 DNAPCR 檢測人粒細(xì)胞無形體。
Taqman 熒光探針靶向菌株 ompA 外膜蛋白基因，微量血液胞內(nèi)菌可檢出。
外周血裂解白細(xì)胞釋放菌體 DNA，菌種引物擴(kuò)增區(qū)分其他埃立克體。
?操作步驟?：
RNA提?。菏褂门涮自噭┗蛏虡I(yè)試劑盒提取樣品RNA。
反應(yīng)配制：按說明書比例混合預(yù)混液、引物探針、模板RNA及對(duì)照。
PCR擴(kuò)增：
預(yù)變性：95℃ 2分鐘；
循環(huán)：95℃ 15秒 → 60℃ 30秒（40個(gè)循環(huán)），于FAM通道采集信號(hào)。
結(jié)果分析：通過Ct值判定病毒含量，陽性對(duì)照需出現(xiàn)典型擴(kuò)增曲線，陰性對(duì)照無信號(hào)。
?注意事項(xiàng)?：
試劑禁止反復(fù)凍融，分裝為小體積 - 20℃保存，融化后冰上放置不超過 2 h
所有耗材必須無 DNase/RNase，吸頭一次性使用，廢液、廢棄 PCR 管 121℃高壓滅菌后丟棄
陽性質(zhì)粒高拷貝，開蓋全程在生物安全柜操作，防止氣溶膠污染實(shí)驗(yàn)室
試劑盒僅限科研檢測，禁止人、臨床樣本檢測
試劑盒過期、試劑渾濁、變色禁止使用
若大量樣本出現(xiàn)陰性對(duì)照帶污染，立即更換全新試劑盒，徹底紫外消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、移液器
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