本試劑盒專為反芻獸埃立克體檢測設(shè)計(jì),靶向該病原特異性基因序列,可精準(zhǔn)檢測牛羊等反芻動物血液、組織樣本中的埃立克體核酸。試劑盒適配畜牧養(yǎng)殖檢測場景,特異性強(qiáng)、檢出速度快,適用于反芻動物埃立克體病的預(yù)防、診斷和管控。
產(chǎn)品名稱 | 反芻獸埃立克體PCR檢測試劑盒 | 貨號 | YS-P014122 |
英文名稱 | Ehrlichia ruminantiumPCR | 規(guī)格 | 50T |
有效期 | 12個月 | 保存 | -20℃保存 |
基礎(chǔ)原理:

反芻動物源埃立克體特有間隔基因,牛羊血液樣本 DNA 特異性擴(kuò)增。
ompB 外膜蛋白基因 Taqman qPCR,區(qū)分人源與反芻獸埃立克體。
血液白細(xì)胞提取菌體核酸,菌種特異性引物擴(kuò)增條帶判定陽性。
?操作步驟?:

樣本制備:
使用CTAB法或商業(yè)DNA提取試劑盒從組織中提取基因組DNA。
建議DNA濃度≥20 ng/μL,A260/A280比值1.8~2.0。
反應(yīng)體系配制(20 μL體系示例):
預(yù)混PCR Master Mix(含染料、dNTPs、Taq酶等)
特異性引物混合液
模板DNA(2~5 μL)
補(bǔ)充無核酸酶水至終體積。
PCR擴(kuò)增程序:
預(yù)變性:95℃ 5分鐘;
循環(huán)階段(40~45 cycles):95℃ 10秒 → 60℃ 30秒(采集熒光信號);
熔解曲線分析:60~95℃(可選,用于驗(yàn)證擴(kuò)增特異性)。
結(jié)果判讀:
陽性:Ct值≤35且熔解曲線峰單一;
陰性:Ct值≥40或無擴(kuò)增曲線;
可疑:35<Ct值<40,建議復(fù)測或結(jié)合熔解曲線分析。
?注意事項(xiàng)?:

所有耗材必須無核酸酶,吸頭一次性使用,禁止重復(fù)吸??;
陽性模板拷貝濃度高,開蓋操作輕柔,避免氣溶膠擴(kuò)散造成全域污染;
試劑融化后冰上放置不超過 2 h,用完立即放回 - 20℃;
廢棄 PCR 管、擴(kuò)增產(chǎn)物、實(shí)驗(yàn)廢液統(tǒng)一 121℃高壓滅菌后丟棄;
試劑盒僅用于動植物、水產(chǎn)、微生物疫病科研檢測,禁止人體臨床檢測;
移液器、操作臺定期紫外消毒,長期污染需更換全新試劑盒全套試劑。
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關(guān)鍵字: 反芻獸埃立克體;PCR檢測試劑盒;
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