?產(chǎn)品名稱：禽杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Fowl CalicivirusRTPCR
貨號(hào)：YS-P014208
分類：PCR檢測(cè)試劑盒
規(guī)格?：50T/盒
檢測(cè)原理：
靶標(biāo)禽杯狀病毒 VP2 衣殼基因，不交叉擴(kuò)增哺乳動(dòng)物杯狀病毒
雞鴨糞便、氣管拭子提取病毒 RNA，RT-PCR 熒光定量擴(kuò)增
熒光信號(hào)陽(yáng)性判定家禽消化道、呼吸道杯狀病毒感染
實(shí)驗(yàn)流程：
（一）反應(yīng)體系配制（冰上操作，防酶失活與污染）
按 “水→緩沖液→dNTP→引物→模板→Taq 酶” 順序加樣（酶最后加，避免失活）。
輕輕渦旋混勻，短暫離心（3000rpm，10s），使液體沉至管底。
無熱蓋的 PCR 儀：加 1 滴礦物油覆蓋液面，防止蒸發(fā)。
（二）PCR 程序設(shè)置（標(biāo)準(zhǔn) 35 循環(huán)）
預(yù)變性：94℃，3-5min（徹底變性模板 DNA）。
循環(huán)階段（35 次）：
變性：94℃，30s（雙鏈解鏈）。
退火：55-65℃，30s（引物結(jié)合模板，按引物 Tm 值調(diào)整）。
延伸：72℃，1min/kb（Taq 酶合成新鏈，1kb 片段約 1min）。
終延伸：72℃，5-10min（確保片段完整延伸）。
保溫：4℃，∞（防止非特異性復(fù)性，短期保存）。
（三）產(chǎn)物檢測(cè)（瓊脂糖凝膠電泳）
制膠：1% 瓊脂糖凝膠（1g 瓊脂糖 + 100mL 1×TAE 緩沖液），加熱融化后加核酸染料，倒膠插梳，凝固 30min。
上樣：取 5μL PCR 產(chǎn)物 + 1μL 上樣緩沖液，點(diǎn)樣；同時(shí)加 DNA Marker（分子量對(duì)照）。
電泳：120V，20-30min，至溴酚藍(lán)遷移至凝膠 2/3 處。
成像：凝膠成像系統(tǒng)觀察條帶，目標(biāo)片段位置與預(yù)期一致則為陽(yáng)性。
四、參數(shù)優(yōu)化
退火溫度（Tm）：引物 Tm 值 = 4×(G+C)+2×(A+T)，退火溫度一般低于 Tm 值 5℃，溫度過高無條帶，過低非特異性條帶多。
Mg2?濃度：1.5-2.5mM，濃度過低酶活性低、產(chǎn)量少；過高非特異性擴(kuò)增增加。
循環(huán)數(shù)：25-35 個(gè)循環(huán)，少于 25 個(gè)產(chǎn)物不足，多于 35 個(gè)易出現(xiàn)非特異性條帶。
延伸時(shí)間：按目標(biāo)片段長(zhǎng)度調(diào)整，≤1kb 用 1min，1-3kb 用 2-3min。
公司正在出售的產(chǎn)品：
假皮疽組織胞漿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 耐萬(wàn)古霉素腸球菌PCR檢測(cè)試劑盒 | 集蛋白亞家族成員11檢測(cè)試劑盒 COLEC11 ELISA Kit |
艱難梭狀芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 委內(nèi)瑞拉馬腦脊髓炎病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 谷氨酸脫羧酶65檢測(cè)試劑盒 GAD65 ELISA Kit |
節(jié)菱孢霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | 赤點(diǎn)石斑魚神經(jīng)壞死病毒（RGNNV）RNA檢測(cè)試劑盒（PCR-熒光探針法） | 核糖核酸酶檢測(cè)試劑盒 RNASE ELISA Kit |
疥螨通用探針法熒光定量PCR試劑盒 | 痘苗病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 間變性淋巴瘤激酶檢測(cè)試劑盒 ALK ELISA Kit |
枯草芽孢桿菌探針法熒光定量PCR試劑盒 | 天花病毒PCR檢測(cè)試劑盒 | 間α-胰蛋白酶抑制因子重鏈H1檢測(cè)試劑盒 ITIH1 ELISA Kit |
卡氏枝孢霉探針法熒光定量PCR試劑盒 | 狄斯瓦螨PCR檢測(cè)試劑盒 | 脊髓灰質(zhì)炎病毒抗原檢測(cè)試劑盒 PV ELISA Kit |
柯拉松血吸蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | 水痘帶狀皰疹病毒即人皰疹病毒型PCR檢測(cè)試劑盒 | 禽杯狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒堿性亮氨酸拉鏈轉(zhuǎn)錄因子ATF樣蛋白檢測(cè)試劑盒 BATF ELISA Kit |
克氏食道線蟲探針法熒光定量PCR試劑盒 | 瓦螨通用PCR檢測(cè)試劑盒 | 活化凝血因子Ⅻ檢測(cè)試劑盒 FⅫa ELISA Kit |
巨細(xì)胞病毒探針法熒光定量PCR試劑盒 | 雅氏瓦螨PCR檢測(cè)試劑盒 | 黑素瘤衍生亮氨酸拉鏈額外核因子檢測(cè)試劑盒 MLZE ELISA Kit |
注意事項(xiàng)：
分區(qū)操作：試劑配制、樣品處理、PCR擴(kuò)增需在獨(dú)立區(qū)域進(jìn)行，避免交叉污染
無菌操作：使用帶濾芯槍頭、一次性手套和專用工作服
試劑準(zhǔn)備：所有試劑使用前需完全融化，震蕩混勻后短暫離心
避光保存：含熒光探針的試劑需避光保存和操作
防止污染：陽(yáng)性對(duì)照操作需最后進(jìn)行，實(shí)驗(yàn)后用10%次氯酸或75%酒精消毒工作臺(tái)
關(guān)鍵字： 禽杯狀病毒;PCR檢測(cè)試劑盒;
上海研生實(shí)業(yè)有限公司成立于2011年專業(yè)銷售各種科學(xué)實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品，包括分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、等多個(gè)研究及應(yīng)用領(lǐng)域。旗下有“上研生"品牌。
我們努力將歐美進(jìn)口品牌的產(chǎn)品推薦給各類研究人員；另一方面也非常重視國(guó)內(nèi)科研市場(chǎng)的產(chǎn)品開發(fā)，推出了一系列具有競(jìng)爭(zhēng)力的產(chǎn)品和服務(wù)。
同時(shí)國(guó)家對(duì)于生物行業(yè)的發(fā)展給予極大的重視，更多地側(cè)重于科研的投入。公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)在同行獲得認(rèn)可。也具備豐富的管理經(jīng)驗(yàn)，同時(shí)我們建立了集技術(shù)支持、售后服務(wù)等多方位的服務(wù)體系。我們有激情、有理想，更有責(zé)任感，是您科研道路上值得信賴的伙伴。
公司的理念是：以誠(chéng)信為本，努力打造優(yōu)質(zhì)品牌，為您提供產(chǎn)品的售中、售后服務(wù)。