本試劑盒基于經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理，酶標板固定大鼠抵抗素特異性捕獲抗體，加入標準品與待測大鼠生物樣本，樣本中的抵抗素抗原與固相抗體特異性結合，洗板清除未結合雜質(zhì)，加入HRP標記的抵抗素檢測抗體，形成特異性免疫復合物，經(jīng)充分洗滌后加入顯色底物顯色，顯色深淺與樣本抵抗素含量呈正相關，終止反應后檢測吸光度，結合標準曲線完成定量分析。
基本參數(shù)?：

產(chǎn)品名稱：大鼠抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒

英文名稱：rat Resistin ELISA Kit
貨號：Y-E1596

規(guī)格：48T/96T

靈敏度：最低檢測靈敏度≤0.9ng/mL

檢測范圍：1.8ng/mL - 70ng/mL

反應時間：總反應時長90分鐘（溫育60分鐘、顯色30分鐘）

保存條件：2-8℃避光密封保存，禁止凍融試劑

有效期：原裝試劑盒12個月有效期

顯色系統(tǒng)：經(jīng)典TMB雙組分顯色系統(tǒng)，顯色均勻穩(wěn)定

檢測波長：450nm/630nm雙波長檢測

標準曲線繪制：梯度標準品OD值擬合四參數(shù)標準曲線，精準定量

特異性：特異性識別大鼠抵抗素，與脂聯(lián)素、瘦素等脂肪因子無交叉反應

重復性：板內(nèi)CV≤6%，板間CV≤8%

注意事項：血清樣本需清澈，脂血會干擾檢測；溫育溫度嚴格37℃，保證抗原抗體結合效率。
通用注意事項：

樣本要求

血清、血漿避免嚴重溶血、脂血、黃疸；組織勻漿充分離心去除沉淀；樣本分裝凍存，反復凍融≥3 次會導致抗原降解，檢測值偏低。

溫度控制

孵育溫度嚴格 37℃，溫箱溫度波動、室溫過低會降低結合效率，背景升高、重復性變差。

避光操作

TMB 底物、酶結合物、神經(jīng)遞質(zhì) / 維生素類靶標樣本見光易氧化，顯色全程避光，試劑避光存放。

洗板規(guī)范

洗滌不充分會造成高背景、假陽性；拍干時使用干凈吸水紙，禁止交叉污染微孔。

污染防控

實驗耗材無 DNase、RNase、蛋白酶；槍頭一次性更換，標準品與樣本避免交叉加樣；底物液變色、出現(xiàn)沉淀不可使用。

安全防護

終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，避免接觸皮膚、黏膜；實驗廢液集中收集中和后處理，不可直接傾倒。

失效判定

試劑盒超出有效期、試劑渾濁變色、標準品梯度無明顯顏色差異，均判定失效，禁止繼續(xù)實驗。

稀釋校正

樣本 OD 值高于最高標準孔時，必須稀釋重測，最終結果乘以稀釋倍數(shù)；低于最低檢測限標注 “低于試劑盒靈敏度”。

空白對照

空白孔吸光度應極低，若空白孔 OD＞0.1，說明洗滌不充分或試劑污染，實驗作廢重做。

儲存禁忌

試劑盒不可冷凍結冰，冷凍會造成酶標抗體蛋白變性，直接導致試劑盒完全失效。
實驗步驟如下：

試劑盒試劑室溫平衡 24min，洗滌液 1:21 稀釋，大鼠脂肪組織上清低溫分裝保存。

各微孔添加 100μL 抵抗素標準品、脂肪上清、空白稀釋液。

酶標記特異性抗體 100μL 每孔，封板 37℃孵育 58min。

洗滌浸泡 28s，洗 3 次，吸干水分。

避光 TMB 顯色液 100μL，37℃孵育 13min。

終止液混勻微孔液體。

讀取 OD450，定量大鼠抵抗素濃度。
公司正在出售的產(chǎn)品：