本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)原理，酶標(biāo)板微孔內(nèi)預(yù)包被大鼠ENA-78/CXCL5特異性抗體。實(shí)驗(yàn)中，樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的目標(biāo)趨化因子與固相抗體特異性結(jié)合，洗孔去除游離物質(zhì)后，加入辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的檢測(cè)抗體，形成完整免疫夾心復(fù)合物。底物催化顯色后終止反應(yīng)，測(cè)定吸光度，數(shù)值與樣本中ENA-78/CXCL5濃度成正比，依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線可精準(zhǔn)定量樣本中目標(biāo)因子含量。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)ELISA試劑盒 | 貨號(hào) | Y-E1390 |
英文名稱 | ENA-78 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測(cè)濃度0.22pg/mL，超高靈敏度適配炎癥微量因子檢測(cè)。
檢測(cè)范圍：0.5pg/mL - 150pg/mL，適配大鼠血清、炎癥組織、細(xì)胞上清樣本。
反應(yīng)時(shí)間：總時(shí)長(zhǎng)115分鐘，樣本溫育50分鐘、二抗溫育40分鐘、顯色25分鐘。
保存條件：所有組分2-8℃避光保存，嚴(yán)禁冷凍，稀釋后洗滌液4℃可存5天。
有效期：原裝有效期12個(gè)月，多次取用后剩余試劑1個(gè)月內(nèi)用完。
特異性：特異性結(jié)合大鼠CXCL5/ENA-78，與其他趨化因子家族蛋白無(wú)交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤8%，板間CV≤10%，炎癥因子檢測(cè)誤差可控。
注意事項(xiàng)：炎癥樣本需及時(shí)檢測(cè)，避免因子降解；實(shí)驗(yàn)耗材需無(wú)熱源、無(wú)內(nèi)毒素污染。
關(guān)鍵注意事項(xiàng)：
實(shí)驗(yàn)前需仔細(xì)閱讀對(duì)應(yīng)試劑盒的說(shuō)明書(shū)，不同試劑盒的孵育時(shí)間、加樣量可能存在差異
所有試劑需按要求儲(chǔ)存，未用完的試劑需密封后放回規(guī)定溫度（通常2-8℃或-20℃）
避免試劑污染，不同組分的移液器槍頭需分開(kāi)使用
洗板時(shí)需確保每孔都被洗滌液覆蓋，防止出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果
顯色過(guò)程需避光，避免陽(yáng)光直射影響結(jié)果
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實(shí)驗(yàn)操作流程：
試劑盒常溫平衡 27min，按配比稀釋濃縮洗滌液，逐級(jí)稀釋 ENA-78 標(biāo)準(zhǔn)品，設(shè)定酶標(biāo)板空白對(duì)照、標(biāo)準(zhǔn)梯度、待測(cè)樣本區(qū)域。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入對(duì)應(yīng)濃度 ENA-78 標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，樣本孔加入大鼠細(xì)胞上清樣本 50μL，空白孔添加稀釋液 50μL，全部孔加入酶結(jié)合工作液 100μL，密封封板。
37℃避光孵育 48min，完成特異性免疫結(jié)合反應(yīng)。
去除封板，棄液后洗滌液注滿每孔浸泡 38s，甩干洗板 4 次，去除非特異性吸附雜質(zhì)。
每孔加入顯色 A 液、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 13min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，水平晃動(dòng)酶標(biāo)板混勻。
酶標(biāo)儀 450nm 測(cè)定吸光度，擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣本 ENA-78 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠上皮中性粒細(xì)胞活化肽78;ENA-78/CXCL5;ELISA試劑盒;
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