本試劑盒基于雙抗體夾心ELISA原理進行定量檢測，酶標板微孔預先包被大鼠NAP-2/CXCL7特異性捕獲抗體。檢測過程中，待測樣本、標準品中的目標趨化蛋白與固相抗體特異性結合，洗板去除未結合組分后，加入酶標記的NAP-2/CXCL7檢測抗體，形成穩(wěn)定的免疫復合物。經TMB底物顯色、酸性終止液終止反應后，微孔溶液吸光度值與樣本中NAP-2/CXCL7含量呈正比，通過標準曲線擬合計算，可精準檢測大鼠樣本中該趨化蛋白的濃度。
產品參數(shù)：

?靈敏度：最低檢測濃度≤1.0pg/mL

檢測范圍：2pg/mL - 100pg/mL

反應時間：總反應120分鐘（37℃恒溫孵育60min、酶反應30min、顯色30min）

保存條件：2-8℃冷藏避光，試劑開封后1個月內使用完畢

有效期：12個月

檢測波長：450nm/630nm雙波長校正

標準曲線繪制：梯度稀釋標準品檢測，四參數(shù)擬合曲線，R2≥0.990

注意事項：細胞上清樣本需去除細胞碎片，避免雜質影響抗原抗體結合
實驗前準備工作：

1. 試劑平衡與稀釋

試劑盒所有組分（酶標板、標準品、酶結合物、底物、洗滌濃縮液、樣本稀釋液、終止液）從 2~8℃取出，室溫（20~25℃）放置平衡 30min，嚴禁直接低溫操作。

濃縮洗滌液配制：按標簽標注比例用去離子純水稀釋（常見 20× 濃縮液：1 份濃縮液 + 19 份純水），混勻備用，現(xiàn)配現(xiàn)用。

標準品復溶 / 梯度稀釋：

凍干標準品加入配套標準品稀釋液充分溶解，室溫靜置 10min，輕柔吹打混勻；

按說明書梯度倍比稀釋出 5~7 個濃度梯度標準品，單獨標記，剩余原液分裝 - 20℃避光保存，避免反復凍融。

待測樣本預處理：血清 / 血漿、組織勻漿、細胞上清用樣本稀釋液適當稀釋，渾濁樣本 12000r/min 離心 10min 取上清；溶血、脂血嚴重樣本棄用。

2. 耗材與設備準備

設備：恒溫 37℃孵育箱、酶標儀（450nm 主波長，630nm 參比）、多通道移液槍、吸水濾紙、洗板機（或手動洗板槽）、封板膜、離心管。

耗材無核酸酶、無熱源、無蛋白污染，移液槍提前校準。

取出本次實驗所需酶標板條，剩余未使用板條裝入鋁箔密封袋，加干燥劑 2~8℃避光保存。

3. 孔位規(guī)劃標記

酶標板做好分區(qū)標記：空白孔、零標準孔、梯度標準品孔、待測樣本孔、復孔（所有樣本、標準品建議設置雙復孔降低誤差）。

公司正在出售的產品：

實驗操作流程：

1. 試劑盒組分室溫平衡 32min，稀釋濃縮洗滌液，待測樣本分裝避免反復凍融，裁剪所需酶標條。

2. 標準品孔加入梯度 NAP-2 標準品 50μL，樣本孔上樣 50μL 待測液，空白孔補稀釋液。

3. 每孔加入酶偶聯(lián)抗體液 100μL，封板密封，混勻后 37℃孵育 58min。

4. 棄凈液體，洗滌液洗板 6 次，單次浸泡 30s，拍干孔內殘留液體。

5. 避光加入顯色底物 A、B 各 50μL，37℃避光顯色 19min。

6. 加入終止液 50μL 混勻終止反應。

7. 450nm 讀取 OD 值，繪制標準曲線測定 CXCL7 含量。