本試劑盒基于經(jīng)典雙抗體夾心ELISA原理，酶標(biāo)板微孔預(yù)先固定純化的大鼠NT-3特異性抗體。檢測時，樣本與標(biāo)準(zhǔn)品中的NT-3抗原與固相抗體特異性結(jié)合，洗滌去除游離雜質(zhì)后，加入酶標(biāo)記的NT-3檢測抗體，構(gòu)建夾心式免疫復(fù)合物。經(jīng)底物顯色、終止反應(yīng)后檢測吸光度，吸光度數(shù)值隨樣本NT-3含量升高而增大，通過標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合可精準(zhǔn)定量大鼠樣本中NT-3的表達(dá)濃度。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱 | 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3(NT-3)ELISA試劑盒 | 貨號 | Y-E1645 |
英文名稱 | NT-3 ELISA Kit | 規(guī)格 | 48T/96T |
?靈敏度：最低檢測下限0.25ng/mL，可檢測低豐度NT-3蛋白表達(dá)。
檢測范圍：0.7ng/mL - 110ng/mL，適配大鼠神經(jīng)組織、血清、干細(xì)胞培養(yǎng)上清。
反應(yīng)時間：總時長105分鐘，抗原溫育45分鐘、二抗溫育35分鐘、顯色25分鐘。
保存條件：2-8℃避光密封保存，核心抗體組分禁止室溫放置超過1小時。
有效期：原裝有效期12個月，開蓋后2周內(nèi)完成檢測。
特異性：專一結(jié)合大鼠NT-3，與NT-4、NGF等神經(jīng)營養(yǎng)因子無交叉反應(yīng)。
重復(fù)性：板內(nèi)CV≤7.5%，板間CV≤9.5%，實驗穩(wěn)定性良好。
注意事項：干細(xì)胞上清樣本需過濾處理，避免細(xì)胞雜質(zhì)干擾抗原結(jié)合反應(yīng)。
儲存與有效期：
未開封整套試劑盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷凍；有效期 12 個月。
開封后保存
剩余酶標(biāo)板條：自封袋密封，內(nèi)置干燥劑 2～8℃避光；1 個月內(nèi)用完。
HRP 酶結(jié)合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
濃縮洗滌液：2～30℃常溫保存，結(jié)晶溫水溶解不影響效果。
復(fù)溶后標(biāo)準(zhǔn)品：分裝 - 20℃凍存，避免反復(fù)凍融，1 個月內(nèi)使用。
過期試劑禁止使用。
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實驗操作流程：
試劑盒常溫放置 29min，稀釋濃縮洗滌液，配制 NT-3 梯度標(biāo)準(zhǔn)溶液，拆分酶標(biāo)板條并編號分類，制備大鼠神經(jīng)組織提取上清。
標(biāo)準(zhǔn)孔加入不同濃度 NT-3 標(biāo)準(zhǔn)液 50μL，樣本孔加入待測組織上清 50μL，空白孔加稀釋液 50μL，全孔加入酶標(biāo)記二抗工作液 100μL，密封封板。
37℃避光孵育 58min，固相載體捕獲靶標(biāo)抗原。
去除封板棄液，洗滌液浸泡每孔 37s，甩干后洗板 4 次，去除非特異結(jié)合雜質(zhì)。
每孔加入顯色 A、B 液各 50μL，混勻后 37℃避光顯色 14min。
加入終止液 50μL 終止顯色反應(yīng)，輕晃酶標(biāo)板混勻。
450nm 波長讀取吸光值，計算樣本 NT-3 含量。
關(guān)鍵字： 大鼠神經(jīng)營養(yǎng)因子3;NT-3;ELISA試劑盒;
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